摩尔吸光系数是物质对某波长的光的吸收能力的量度。ε 越大，吸收光的能力越强，相应的分光光度法测定的灵敏度就越高。ε 值越大，说明电子跃迁的几率越大，通常 ε＝10～105：一般认为ε＞104为强吸收；ε＝103～104为较强吸收；ε＜102 为弱吸收，此时分光光度法不灵敏。
因为通常使用分光光度计可检测出的最小吸光度A＝0.001，所以，当b＝1cm，ε＝105时，可检测的溶液最小浓度是C＝10-8 mol/L。
常用的吸光系数还有一种百分吸光系数，即在某一波长下，溶液浓度为1%(W / V)，液层厚度b＝1cm 时的吸光度，以E1%λmax 表示。
即混合物的总吸光度等于溶液中的各组份各自在该波长下吸光度的算术和。这是多元混合物分光光度法定量分析的基础。
若溶液中各溶质的吸光系数ε 相同，则各溶质吸光度的大小与溶质浓度成比例。例如，离子交换柱层析分离核苷酸实验中可利用吸光光度计算回收率：
m＝C·V
分光光度计的组成和构造
组成:
各种型号的紫外/可见分光度计，不论是何种型式，基本上都由五部分组成：①光源；②单色器(包括产生平行光和把光引向检测器的光学系统)；③样品室；④接收检测放大系统；⑤显示或记录器。
构造:
⑴ 光源
理想光源的条件是：①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用寿命长，价格低。
