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细菌原生质体融合
作者:未知 来源:郑州轻工业学院 时间:2006-9-21


    附录 细菌原生质体融合试验用培养基
    1. 完全培养基(CM)
    蛋白胨 1 g
    葡萄糖 1 g
    酵母粉 0.5 g
    牛肉膏 0.5 g
    NaCl 0.5 g
    蒸馏水 100 mL
    pH 7.2
    100 Pa 灭菌20 min。
    如需配制固体完全培养基时,则需在上述液体培养基中加入2%琼脂。
    2. 基本培养基(MM)
    葡萄糖 0.5 g
    (NH4)2SO4 0.2 g
    柠檬酸钠 0.1 g
    K2HPO4·3H2O 1.4 g
    KH2PO4 0.6 g
    MgSO4·7H2O 0.02 g
    蒸馏水 100 mL
    纯化琼脂 2 g
    pH 7.0
    100 Pa 灭菌20 min。
    3. 高渗再生培养基(CMR)
    蛋白胨 1 g
    葡萄糖 0.5 g
    酵母粉 0.5 g
    牛肉膏 0.5 g
    NaCl 0.5 g
    蔗糖 0.5 mol/L
    MgCl2 20 mmol/L
    纯化琼脂 2 g
    pH 7.0
    100 Pa 灭菌20 min。
    如配上层固体培养基,需在上述液体培养基中加入0.6%琼脂。如需配底层固体培养基,则需加入2%琼脂。
    4. 补充基本培养基(SM)
    在基本培养基中加入20 ug/mL 腺漂吟及2%纯化琼脂。
    70Pa 灭菌20 mm。
    5. 再生补充基本培养基(SMR)
    在补充基本培养基中加入0.5 mol/L 蔗糖及2%纯化琼脂。
    70 Pa 灭菌 20 min。
    6. 酪蛋白培养基(测蛋白酶活性用)
    Na2HPO4·12H2O 0.13 g
    KH2PO4 0.036 g
    NaCl 0.01 g
    ZnSO4·7H2O 0.002 g
    CaCl2·2H2O 0.0002 g
    酪素 0.4 g
    酪素水解氨基酸 0.005 g
    琼脂 1.5~2 g
    蒸馏水 100 mL
    pH 7.2
    100 Pa 灭菌20 min。
    7. 0.1 mol/L 磷酸缓冲液(pH 6.0、pH 7.0)
    K2HPO4 相对分子质量=174.18,0.1 mol/L 溶液为17.4g/L,称取17.4 g K2HPO4,溶解于蒸馏水中,定容至1000 mL。
    KH2PO4 相对分子质量=136.09,0.1 mool/L 溶液为13.6 g,称取13.6 g KH2PO4, 溶解于蒸馏水
    中,定容至1000mL。
    蒸馏水 100 mL

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