附录 细菌原生质体融合试验用培养基
1. 完全培养基(CM)
蛋白胨 1 g
葡萄糖 1 g
酵母粉 0.5 g
牛肉膏 0.5 g
NaCl 0.5 g
蒸馏水 100 mL
pH 7.2
100 Pa 灭菌20 min。
如需配制固体完全培养基时,则需在上述液体培养基中加入2%琼脂。
2. 基本培养基(MM)
葡萄糖 0.5 g
(NH4)2SO4 0.2 g
柠檬酸钠 0.1 g
K2HPO4·3H2O 1.4 g
KH2PO4 0.6 g
MgSO4·7H2O 0.02 g
蒸馏水 100 mL
纯化琼脂 2 g
pH 7.0
100 Pa 灭菌20 min。
3. 高渗再生培养基(CMR)
蛋白胨 1 g
葡萄糖 0.5 g
酵母粉 0.5 g
牛肉膏 0.5 g
NaCl 0.5 g
蔗糖 0.5 mol/L
MgCl2 20 mmol/L
纯化琼脂 2 g
pH 7.0
100 Pa 灭菌20 min。
如配上层固体培养基,需在上述液体培养基中加入0.6%琼脂。如需配底层固体培养基,则需加入2%琼脂。
4. 补充基本培养基(SM)
在基本培养基中加入20 ug/mL 腺漂吟及2%纯化琼脂。
70Pa 灭菌20 mm。
5. 再生补充基本培养基(SMR)
在补充基本培养基中加入0.5 mol/L 蔗糖及2%纯化琼脂。
70 Pa 灭菌 20 min。
6. 酪蛋白培养基(测蛋白酶活性用)
Na2HPO4·12H2O 0.13 g
KH2PO4 0.036 g
NaCl 0.01 g
ZnSO4·7H2O 0.002 g
CaCl2·2H2O 0.0002 g
酪素 0.4 g
酪素水解氨基酸 0.005 g
琼脂 1.5~2 g
蒸馏水 100 mL
pH 7.2
100 Pa 灭菌20 min。
7. 0.1 mol/L 磷酸缓冲液(pH 6.0、pH 7.0)
K2HPO4 相对分子质量=174.18,0.1 mol/L 溶液为17.4g/L,称取17.4 g K2HPO4,溶解于蒸馏水中,定容至1000 mL。
KH2PO4 相对分子质量=136.09,0.1 mool/L 溶液为13.6 g,称取13.6 g KH2PO4, 溶解于蒸馏水
中,定容至1000mL。
蒸馏水 100 mL


