注：若用d1 型氨基酸，量应加倍，若用酪素水解物作混合氢基酸，应补加胱氨酸(50 mg/mL)和色氨酸

(3) 基本培养基加混合维生素溶液

在配制基本培养基时，将9 种维生素分别依次缺少一种而使其中含有其他8 种维生素，

然后接入待测定菌，在哪种培养基上不长菌，就是缺哪种维生素的营养缺陷型

（4）基本培养基加混合核酸碱基溶液
配制基本培养基时，将7 种核酸碱基分别依次缺少一种而使其中含有其他6 种核酸碱基然后接入
待测定菌，在哪种培养基上不长菌，就是缺哪种核酸碱基的营养缺陷型。
表附3 配制合成培养基时添加核酸碱基浓度表

注：RNA 水解液可代替核酸碱基溶液，可用于混合核酸碱基溶液
上述氨基酸、维生素和核酸碱基均应磨细后分装成小管，放干燥器中避光保存，临用时配成溶液，过滤除菌。
RNA 水解液的配制：
取2 g RNA，加入15 mL 1 mol/L NaOH；另取2 g RNA，加入15 mL 1 mol/L HCl，分别于100℃水浴加热水解20 min，将两种溶液混合，调pH 为6.0，过滤后调整体积为40 mL。可用RNA 水解液作为混合核酸碱基。
如用水解干酪素作为混合氨基酸，则需添加胱氨酸50 mg/L 和色氨酸10 mg/L。
试剂配制
(一) 0.5 mol/L 硫代硫酸钠溶液(浸泡沾染过NTG 的破璃器皿)
称取124 g 硫代硫酸钠(Na₂S₂O₃·5H₂O)，溶于蒸馏水中，定容至1000 mL，贮于棕色瓶中，保存备用。
(二) 0.2 mol/L 磷酸缓冲液(pH 5.8、pH 6.0、pH 7.4)
Na₂HPO₄·2H₂O 相对分子质量为178.05，0.2 mol/L 溶液含35.61 g/L，称取35.61 g Na₂HPO₄·2H₂O ，溶解于蒸馏水中，定容至1000 mL。
NaH₂PO₄·H₂O 相对分子质量为138.01，0.2 mol/L 溶液含27.6 g/L，称取27.6 g NaH₂PO₄·H₂O ，溶解于蒸馏水中，定容至1000 mL。

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