一、实验目的 1.了解简单染色法的原理，并掌握其操作方法。 2.学习并掌握微生物涂片、染色的基本技术和无菌操作技术。 3.巩固显微镜(油镜)的使用方法。 4.初步认识细菌的形态特征。 二、实验原理 细菌个体微小，且较透明，必须借助染色法使菌体着色，与背景形成鲜明的对比，以便在显微镜下进行观察。根据实验目的不同，可分为简单染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。简单染色法是最基本的染色方法，是利用单一染料对细菌进行染色。此法操作简便，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱性染料进行简单染色。 三、试剂与器材 1.材料 大肠杆菌，枯草芽孢杆菌 2.试剂 吕氏碱性美蓝染液(或草酸铵结晶紫染液)、齐氏石炭酸复红染液。 3.器材 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶(内装香柏油和二甲苯)等。 四、实验内容 简单染色法：涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检 五、关键步骤及注意事项 1.涂片时，生理盐水及取菌不宜过多，涂片应尽可能均匀， 2.水洗步骤水流不宜过大，过急，以免涂片薄膜脱落。