4．透蜡
1在透蜡以前，先做好准备工作，选取适当熔点的石蜡，熔化，分装在（1）号、（2）号、（3）号三个蜡杯内，置入熔蜡箱（55—60℃）。另外再准备一杯石蜡，供包埋用，也置于熔蜡箱内，一定要控制好熔蜡箱的温度，保持恒定。
2将已透明的蚕豆根尖从二甲苯中取出，放入蜡杯（1）
杯（3）半小时后，即可包埋。 5．折纸盒 按组织之大小折成纸盒，盒上注明材料名称，切片方向等。
6．包埋
1准备好包埋用的吸管，小镊子，放入熔蜡箱内，使之温热。
2用温热吸管吸热石蜡注入纸盒内，用温镊子夹取组织块放入盒的中央位置。
3将纸盒一半浸入冷水中，待表面石蜡凝成一层膜后，将纸盒迅速全部浸入冷水中，待石蜡全部凝结变硬即可取出。
7．修切蜡块 把包埋好的蜡块用刀片修切成正方形或长方形，注意勿太靠近组织，让组织四周留有少许石蜡。蜡块两边必须切成平行的直线，以免切下的蜡条弯曲。
8．固定蜡块 取小木块，用蜡铲加上热石蜡，再熔化蜡块底面，粘于小木块上，冷却后装在切片机上。
9．切片 在开始切片前，先熟悉切片机的构造和用法，装上切片刀，注意刀的倾角不宜过大，亦不宜过小，大致上以20—30度为宜。如倾角过大，则切片上卷，过小，则切片皱起。
切片时应做到下列各点：
1调整刻度指针到要求的厚度，一般要求5—8υ。切片刀要拭净。
2用右手摇切片机转轮，左手持毛笔托住蜡带。转动切片机时不可太快，用力宜均匀，不可时快时慢。防止机器震动太厉害，以致切片厚薄不均匀。
3用毛笔托住蜡带，放在切片盒内。
切片时如出现各种问题，应找出原因加以解决，一般有以下几种原因：
1切片不能形成蜡带：是室温过低或石蜡过硬，蜡边过小或不平所致，这时应提高室温，或在切片机旁点燃酒精灯。
2蜡带弯曲：蜡块上下不平行，刀钝，蜡块不与刀刃平行，均可产生此现象。
3蜡片卷起：刀口太钝或不清洁，刀的角度过大或石蜡过硬，蜡片均会卷起。
4蜡片易粘在切片刀上或蜡片皱缩：室温过高或石蜡太软所致，用冷水或冰块冰一下即可。刀的角度过小，也能使切片皱缩。
5蜡片厚薄不一：刀或蜡块没有固定牢，切片机磨损或发生故障。
6蜡片出现裂隙或碎裂：组织浸蜡不足，或浸蜡温度过高，或在透明剂中时间过久，组织已发脆。
7蜡片出现纵裂口：刀有缺口或石蜡内有硬物质如钙盐物质，或刀口不洁。
8蜡块底面成白色：由于刀口的角度过小，被刀碰撞的结果。
10．展片、贴片
1准备好展片台，使温度保持在比包埋石蜡的熔点低5—6℃，如包埋石蜡的熔点为53℃，则水温宜在48℃左右。如果温度过低，则展片费时过长；反之温度过高，石蜡会熔化。
2取沼净的载玻片涂以甘油蛋白：
以玻棒尖端稍稍蘸取甘油蛋白一滴，轻轻滴于载玻片中央，然后以洗净的手指加以涂布，涂布的面不宜太广，而以恰恰能够贴附蜡片为度。甘油蛋白不能涂布过多，否则，会形成白膜，妨碍观察。
3在涂有甘油蛋白的载玻片上滴二滴蒸馏水，用也片将蜡带切成适当长度的片段，以小镊子夹取蜡带，使浮在玻片的水上，摆正位置（一般稍偏于玻片的一端，留下地位可以粘贴标签）。然后把玻片放在展片台上，蜡带受热即自动展开，也可用解剖针轻轻拉开。待蜡片完全展平后，用吸水纸吸去多余水分。注意切片和载玻片之间不能有气泡，否则在展片时气泡会扩大，影响以后镜检。
4蜡片在载玻片上展开后，即取下放在切片木框上，让其自然干燥，或置入37℃温箱内干燥。
5干燥的片子留待下次实验用
