[方法与步骤]
1.实验仪器的准备
打开计算机采集系统,接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条,使显示器显示压力读数。
2.连通液导系统并制压
将压力传感器的下方支管,通过输液管连接三通管,再连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有20ml 4%柠檬酸钠的注射器,通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注,使之充满液体(不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管)后,再用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然后继续向三通管内推注,直至充满压力传感器的上方支管,并用塞子塞住(注意:液导系统内不可有气泡)。继续向三通管内推注,同时观察显示器上压力变化。当加压到120 mmHg时即可关闭三通管。观察压力是否发生变化,如果压力下降,则需要检查液导系统的漏液原因,并重新制压。调节血压显示器的灵敏度,使30~130 mmHg的变化都能在显示器上明显地反映出来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。
3.动物的准备
1)麻醉动物
取家兔一只,称重并剪去耳缘静脉上的被毛。用20ml注射器由耳缘静脉缓慢推注20%(或25%)氨基甲酸乙酯(1 g/kg体重)进行麻醉。注射时注意:先从耳缘静脉尽可能远心端注射(第一次注射不成功时,可稍向近心一些注射),注射时速度要慢,并随时观察动物情况。当动物四肢松软、呼吸变深变慢、角膜反射迟钝时,表明动物已被麻醉,即可停止注射。
2)固定与剪毛
将动物背位固定于手术台上,用剪毛剪将颈部手术野的被毛剪去,即可进行手术。
3)切开皮肤
术者一手的拇指和示指按住家兔颈部两侧,另一手持手术刀,在紧靠喉头下缘,沿颈部正中线作一长约5~7cm的皮肤切口。然后用止血钳或手术剪分离皮下结缔组织后,夹住少许皮肤并向两侧分开创口。
4)分层分离肌肉
术者与助手分别持止血钳轻轻提起少许气管正上方的肌肉(距离要尽可能近),然后用手术剪在两止血钳夹住的肌肉之间,纵向(沿肌肉纤维走向)将肌肉层剪开一个小口(亦可用止血钳创开口)。用剪刀或止血钳将创口纵向扩大,再用止血钳夹住少许肌肉,向两侧分开肌层。继续用两把止血钳夹住下层气管上方的少许肌肉,轻轻提起,同法剪开并扩大肌肉创口。如此层层分离肌肉,直至看见肌肉层下方的气管(如果创口不够大,亦可用两手示指深入创口后再向前后方撕裂肌膜,使创口扩大)。用止血钳向气管两侧拉开最后一层肌肉,暴露出气管(图4—19)。手术时,注意切口不可偏离气管上方,不可横向剪断肌肉,以免造成血管断裂而出血。切口也不要过于扩大,以免造成气胸。如果发现肌肉或血管有少量出血,可用浸过温热生理盐水的纱布(不可过湿)轻轻按压止血;如果出血不止,应立即用止血钳夹住出血部位,然后用棉线结扎止血。
5)分离主动脉神经
家兔颈部的神经、颈总动脉被结缔组织膜包在一起,形成血管神经束,位于气管两侧,其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。术者用拇指和示指轻轻捏住分离的肌肉和皮肤,使示指向上顶而拇指向外翻,即可将血管神经束翻于示指之上。用弯头玻璃分针轻轻划开局部结缔组织束膜,仔细辨认3种神经与颈总动脉(图4—19):颈总动脉呈红色,有波动,壁有较强的弹性;迷走神经最粗,有较好的韧性,色洁白,一般位于外侧;交感神经较细,略呈灰色,一般位于内侧;主动脉神经最细,一般位于两神经之间。由于主动脉神经纤细,离开神经、动脉束的包膜后则难以分辨,所以应在原自然位置首先找到,并用玻璃分针沿纵向轻轻划动,分离出2 cm左右(此神经的韧性很差,易于拉断,分离时需十分小心)。用玻璃分针轻轻挑起分离后的神经,再用弯头眼科镊由神经下方穿过,将一浸过生理盐水的彩色丝线放于镊子内,轻轻收回夹住丝线的眼科镊,穿好线并打一活结备用。如果不能辨认出3条神经,则可先在颈总动脉下方穿过一条粗棉线(方法同上,但只分离很小一段动脉,需保留其前后的结缔组织束膜)。当轻轻提起动脉时即可看清3条神经,同法分离主动脉神经。分离主动脉神经、迷走神经并穿线备用。再将止血钳从颈总动脉下方穿过,轻轻张开止血钳,分离出2~3cm长的颈总动脉。分离出的颈总动脉外壁应该十分光洁,外面并无结缔组织及脂肪等物。在动脉上穿两条备用棉线,分别打上活结。将两线分别拉至分离出的动脉两端备用。同样方法分离另一侧血管与神经(一侧动脉用于插管测压,另侧动脉实验用)。由于家兔的品种不同,个体之间也有差异,常发现3条神经的解剖位置有些变异。主动脉神经的最后确认,需以对血压的影响为准。


