4．血管、神经分离术（颈部、腹部）
颈外静脉分离术：哺乳动物的颈外静脉壁薄粗大，且分布很浅。位于颈部皮下、胸骨乳突肌外缘。分离该静脉时，可用左手拇指与食指捏住切口一侧的皮肤，再向外翻，可将暗紫色的粗大静脉翻于食指上。用玻璃分针或细止血钳由静脉外侧分离结缔组织，即可将颈外静脉分离出来，然后穿线备用。
颈总动脉分离术：颈总动脉位于气管外侧，腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。可用左手拇指和食指捏住已分离的气管一侧的胸骨肌，再稍向外翻，即可将颈总动脉以及神经束翻于食指上，用玻璃分针或止血钳轻轻分离动脉外侧的结缔组织，便可将颈总动脉分离出来，最后穿线备用。注意：颈部神经与颈总动脉被结缔组织包绕在一起，形成血管神经束，在分离动脉时，应注意神经的部位与走行，沿着动脉分布走向用玻璃分针平行分离，切勿伤及与其伴行的神经。
神经分离术：同颈总动脉分离术。先暴露出血管神经束，然后用玻璃分针小心分离其外的结缔组织膜即可看到与颈总动脉伴行、粗细不同的神经。如仍不能分辨神经类别，可在分离长约0.5cm颈总动脉的基础上，轻轻提起动脉，透过灯光，则可清楚地看到随动脉被拉开的结缔组织鞘膜中的各类神经。颈部的神经分布因动物的种类而不同，兔颈部的血管神经束内有3条粗细不同的神经，其中迷走神经最粗，呈白色，一般位于外侧；交感神经稍细，略呈灰色，一般位于内侧，主动脉神经最细，一般位于迷走神经与交感神经之间（由于主动脉最细，极易拉断，需要分离时应先予分离）。分离神经时需用尖端细而圆滑的玻璃分针，轻轻沿神经平行走向小心分开结缔组织鞘膜，将神经分离出2cm即可穿线备用。
5．腹部手术：在动物实验中，腹白线是腹部切口的常用部位。腹白线是位于腹中线下面的白色腱膜线，从胸骨的剑突隆起直至耻骨联合。腹白线为较宽的结缔组织间层，神经血管分布极少。因此，通过腹白线所作的腹正中切口，不伤及肌肉、神经和血管，对动物损伤较小，较少出血。腹正中切口的长度因实验的要求和动物的种类不同。如在观察兔胃和小肠运动的实验中，需在胸骨剑突下方作8—10cm的切口，才能充分暴露胃和小肠。而在兔尿生成的调节实验中，只需自耻骨联合向前作2—3cm的切口，即可将膀胱引出。
6．采血技术 由于实验动物不同，实验需要和采血数量有别，所选用的采血方法也不同。这里介绍几种实验动物的常用采血技术。
（1）血管采血
兔耳中央动脉采血法：将兔置于兔固定箱内，用酒精棉球擦揉兔耳片刻，使其充血。在兔耳中央有一条纵形、较粗、颜色鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉的末端，沿动脉平行地沿向心方向刺入动脉，轻轻抽动针筒，即可看见血液进入注射器。一次可采血约15ml（采血后应注意止血）。采血一般使用6号针头，不可太细。需加注意的是，兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩，因此采血前必须使兔耳充血。当动脉扩张，未发生痉挛性收缩前立即进行抽血，时间过长，动脉会发生较长时间的收缩，采血难以进行。
此外，兔还可采用股静脉、颈静脉、股动脉及颈总动脉采血，一般需进行动、静脉分离术，而后采血。
小白鼠和大白鼠的颈静脉或颈动脉采血法：将鼠麻醉后背位固定于手术台上，剪去一侧颈部外侧的被毛，做常规颈静脉和颈动脉分离术。用注射器针头沿向心方向平行刺入血管，抽取所需血量。此法采血量：体重20g小白鼠可采血0.6ml左右；体重300g大白鼠可采血8ml左右。同法也可选用股动脉或股静脉采血。
眼球后静脉丛取血法：抓取小鼠或大鼠并将其头部固定，用毛细玻璃管刺入眼球后静脉丛，大鼠可采出2ml血液而不影响生理功能；或将眼球摘除（不保留动物时），小鼠可采出近1ml血液，大鼠可采出近10ml血液。
尾静脉采血：将鼠放入固定筒内，露出鼠尾用手揉擦或温水（45-50℃）加温鼠尾，也可用二甲苯等涂擦鼠尾，使尾静脉充血。用剪刀剪断尾尖（小白鼠约1-2mm,大白鼠约5-10mm）后，即可流出血液。如血流不畅，可用手轻轻从尾根部向尾尖部挤压数次，可采到数滴血液。如实验需要间隔一段时间而多次采血时，每次采血可将鼠尾剪去很小一段，采血后，用棉球压迫止血，并立即用0.6ml液体火棉胶涂于尾部伤口处，使之结一层火棉胶膜，以保护伤口。此外，也可采用尾静脉交替切割法进行间隔、多次性采血。方法是用锋利手术刀片在尾部切一小口，切破一段尾静脉，血液即由伤口流出。此法每次可采0.3-0.5ml血液。可供一般血常规实验。尾部的3条静脉可交替切割，并由尾尖部向尾根部逐次切割，以保证连续多次使用。切割后用棉球压迫止血，约3天后即可结痂痊愈。此法在大白鼠采血是较为常用，效果较好。
（2）心脏采血：将兔背位固定，剪去左侧胸部相当于心脏部位的被毛，用碘酒和酒精消毒皮肤，选择心脏跳动最明显处作穿刺。一般有胸骨左缘外3mm处刺入第3肋间隙；穿刺时，最好用左手触诊心脏，以作配合。当针头接近心脏时就会感到心脏的跳动，这时需将针头再向里穿刺，便可进入心室。由于心脏的搏动，血液会进入注射器。如认为针头已进入心脏，但抽不出血液，可把针头稍微退出或前进一些。心脏采血经6-7天后，可以重复进行。采血量：在兔一次可取血液20-25ml.
7．动物处死方法：
（1）脊柱脱臼法 用左手拇指和食指捏住小白鼠头的后部，并用力下压，右手抓住鼠尾，用力向后上方拉，即可使颈椎脱臼，瞬间死亡（图）。
（2）空气栓塞法 像动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死亡。兔一般选用耳缘静脉。兔静脉内注入20-40ml空气即可致死。
（3）放血致死法 轻度麻醉动物后，固定于手术台上，行股部手术。暴露股三角区，分离股动脉（向心端用动脉夹夹住），并插入一根塑料管。打开动脉夹，使血液流入容器内，一般动物3-5min内即可致死。除股动脉外，常用颈总动脉放血。此法处死动物较为安静，对内脏器官无损伤，使采集病理切片标本，同时采集血液的一种较好的方法。兔可以采用此法处死。
