2．麻醉剂的给药途径及方法
挥发性麻醉剂的用药途径为吸入麻醉，用于全身麻醉；非挥发性麻醉剂的给药途径主要为注射给药法，可进行静脉、腹腔、肌肉、皮下注射，适用于全身麻醉，局部用药适用于局部麻醉。分述如下：
（1）静脉注射：兔的静脉注射常用部位为耳缘静脉。兔耳的外缘血管为静脉，中央的血管为动脉。注射前最好将动物放入兔体固定箱内，使兔头露于箱外，以防注射时挣扎。先除去注射部位的被毛，用左手食指和中指夹住耳缘静脉近心端，使其充血（亦可用动脉夹夹住），并用左手拇指和无名指固定兔耳。用右手持注射器将针头顺血管方向刺入静脉（图），刺入后再将左手食指和中指移至针头处，协同拇指将针头固定于静脉内，便可缓缓注射。如注射阻力过大或局部肿胀，说明针头未刺入血管，应拔出重新刺入。首次注射应从静脉的远心端开始，以便进行反复注射。
（2）腹腔注射：常用腹腔注射麻醉鼠类、兔、蛙类等在腹腔注射鼠类时，要注意安全。对小白鼠可采取手持法进行注射（如图），即用左手小指和无名指将鼠尾夹住，迅速用其他三指抓住鼠耳及颈部皮肤，使其腹部朝上，右手将注射针头刺入下腹部腹白线稍外侧处，注射针与皮肤面呈45°夹角，若针尖通过腹肌后抵抗消失，应保持针头不动，轻轻注入麻醉剂。腹腔注射应防止把针头刺入肠、肝、膀胱等内脏器官，因此针头刺入后须轻轻回抽，如无肠内容物、尿液或血液被抽出，表明针头为刺入内脏。
（3）肌肉注射：注射部位多为胸肌，或腓肠肌等肌肉较发达的部位。兔多选用两侧臀部或股部进行肌肉注射。固定动物后，右手持注射器，使之与肌肉呈60°夹角，一次刺入肌肉。注射完毕后用手轻轻按摩注射部位，帮助药液吸收。
（4）皮下注射：在注射麻醉剂中并不常用。小白鼠的皮下注射通常在背部皮下，可将皮肤拉起，注射针刺入皮下。将针头轻轻向左右摇摆，容易摆动则表明已刺入皮下，然后注射药物。拔针时，可以用手指轻捏注射部位，以防药液外漏。对大白鼠、兔等可选用背部、大腿内侧或臀部等皮下脂肪较少的部位进行皮下注射。
（5）局部麻醉：在用药局部可逆性地阻断感觉神经冲动的发出和传导，在动物意识清醒状态下用药，使其局部感觉消失。一般在用药几分钟内起效，维持1h左右。依实验要求可进行局部浸润、表面麻醉和阻断麻醉。

（三）动物的固定
急性在体实验的手术过程中，必须将麻醉动物稳定地加以固定，以限制动物的活动，保证实验或手术的顺利进行。一般使用各种动物的头夹和固定绑带将动物固定于手术台上，但随手术部位和实验内容的差别，动物的固定方法也不相同。生理学实验中最常使用的动物固定方法有两种：背位（仰卧位）固定法和腹位（俯卧位）固定法，其中关键性的固定部位是头部和四肢。
1．背位（仰卧位）固定法 将动物的背部直接接触手术台的固定方法。在呼吸、循环、消化及泌尿等实验中均采用此法。各类哺乳动物的背位固定法大同小异，现以兔为代表加以说明。
头部的固定：头部的固定通常使用头部固定夹（图），使用时可将相应的头夹固定于手术台前段的直棒上，然后将以麻醉的动物背位置于手术台上，兔头的固定是将兔头夹的半圆铁圈由背部夹持于动物的颈部，然后将金属圆铁圈适度地套紧兔嘴，旋紧螺丝，加以固定（图），但不可过分压迫鼻部，以免影响呼吸。
四肢的固定：在头部固定之后，即可固定四肢，四肢用绑带固定。先将绑带按图打活结，再套进动物前肢的腕关节和后肢的裸关节，将绑带收紧，后肢的绑带可直接拉紧分别扎于手术台两侧的木孔上。除特殊要求外，前肢的固定方法应为：将两前肢平放在胸部的两侧，再把捆绑前肢的两条绑带从动物背部交叉穿过，并压在对侧前肢的前臂上，最后拉紧绑带，固定于手术台两侧的木孔上。这样既将动物稳妥的固定于手术台上。
2．腹位（俯卧位）固定法 腹位固定是动物的腹部直接接触手术台的固定方法。这种固定法适用进行脑、脊髓的实验。兔头部的固定用马蹄形头固定器。其方法是在两侧眼眶下部剪去一小块毛皮，暴露颧骨突，用带1mm钻头的骨钻打一个孔，将固定器两侧的尖头金属棒紧紧嵌入小孔内，加以固定，再调节固定器中间的金属棒高度，使其嵌尖端紧嵌在两门齿缝之间，旋紧螺旋固定之。如果需要头部上仰，可提高固定器前段的垂直铁柱；如需头部下俯，可将该铁柱放低。
动物四肢的固定同前，用绑带缚紧后直接拉紧固定于手术台两侧的木孔上（或直接用手术台两侧的四肢固定夹夹住），前肢的绑带可不进行交叉。
3．蛙类固定法 蛙和蟾蜍的固定法也分背部和腹部两种。规范的固定方法是使用蛙腿针和蛙板，方法较简单。也可用大头针将四肢直接固定在木板上。蛙类头部活动不大，一般不作特殊固定。由于双毁髓蛙类周身瘫软，无须固定。

（四）手术基本操作技术
1．剪毛：在哺乳动物体上进行皮肤切口之前，须将切口部位及其周围的毛剪去。剪毛应使用剪毛剪，持剪方法同一般手术剪。剪毛时，应将剪毛剪的凸面贴近皮肤，依次剪毛，切忌提起毛皮剪毛，以免剪及皮肤。剪下的毛应放入污物缸内，以免兔毛到处飞扬，污染环境（可用沾湿的卫生纸擦去浮毛）。
2．手术切口与止血：作切口前，应注意切口的大小和解剖结构，一般以少切断神经和血管为原则，同时应尽可能使切口与各层组织的纤维方向一致。切口的大小，既要便于手术操作，但又不可过大。做切口时，先用左手拇指和食指、中指将预定切口上端两侧的皮肤固定，右手持手术刀，用持弓式或持笔式，以适当的力量，一次全线切开皮肤和皮下组织，直至肌层。手术过程中要随时注意止血，以免造成手术野血肉模糊，难以分辨血管和神经，延误手术时间。止血方法视出血情况而定，微小血管出血时，要用湿热生理盐水纱布按压止血；较大血管出血时，须先找到出血点，用止血钳夹住，而后用线结扎；大血管破损，应准确、快速止血，否则失血过多，影响实验。实验期间，应将创口暂时闭合，或用温热生理盐水纱布盖好，以免组织干燥。
3．手术打结：手术结不仅是外科手术上的重要技术，也是急性动物实验中的基本技术。手术结有多种，如单结、方结、外科结、脱结、十字结及三叠结等。其中以方结和三叠结最为安全可靠，在生理学实验中，又以方结最为常用，打结的方法有单手打结法、双手打结法和持钳打结法几种。单手打结法（图）最为方便，但结线必须留得长些。持钳打结法（图），适用于结线太短或结扎部位过于深等情况。总之，打结是一种基本技术，在动物实验中经常使用，要经常练习，熟悉掌握。

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