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大肠杆菌营养缺陷型菌株的筛选
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-9-16

    4.缺陷型的检出:

    1)以上平板培养36—48小时后,进行菌落计数。选用完全培养基上长出的菌落数大大超过基本培养基的那一组,用接种针挑取完全培养基上长出的菌落80个,分别点种于基本培养基与完全培养基平板上,先基本后完全,依次点种,放37℃温箱培养。

    2)培养12小时后,选在基本培养基上不生长、而在完全培养基上生长的菌落,再在基本培养基的平板上划线,37℃温箱培养,24小时后不生长的可能是营养缺陷型。

    5.生长谱鉴定:

    1)将可能是缺陷型的菌落接种于盛有5毫升肉汤培养液的离心管中,37℃培养14—16小时。

    2)培养16小时后,离心(3500转/分)10分钟,倒去上清液,打匀沉淀,然后离心洗涤三次,最后加生理盐水到原体积。

    3)吸取经离心洗涤的菌液1毫升于一灭菌的培养皿中,然后倒入融化后冷却至40—50℃的基本培养基,摇匀放平,待凝,共做两皿。

    4)将2只培养皿的皿底等分8格,依次放入混合氨基酸(包括核苷酸),混合维生素和脯氨酸(加量要很少,否则会抑制菌的生长),然后放37℃温箱培养24—48小时,观察生长圈,并确定是哪种营养缺陷型(见图13-1)。

    六、实验结果记录

    1.诱变处理的记录:

    2.生长谱鉴定的记录:

    你所鉴定的缺陷型是哪种缺陷型,生长圈在哪个区。

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