营养缺陷型的检出方法有逐个测定法、夹层培养法、限量补给法、影印培养法等。现简述如下：夹层培养法，先在皿底倒一层不含细菌的基本培养基，待凝后加上一层含菌的基本培养基，冷凝后再加上一层不含菌的基本培养基。经培养出现菌落以后在培养皿底上把菌落做上标记，然后加上一层完全培养基，再经培养以后出现的菌落多数是营养缺陷型。影印培养法，将经处理的细菌涂在完全培养基的表面，待出现菌落以后，用灭菌丝绒将菌落影印接种到基本培养基表面。待菌落出现以后比较两个培养皿，凡在完全培养基上出现菌落而在基本培养基上的同一位置上不出现菌落者，这一菌落便可以初步断定是一个缺陷型。
五、实验步骤
1.菌液制备：
（l）实验前14—16小时，挑取少量K12SF+菌，接种于盛有5毫升肉汤培养液的三角瓶中，置37℃培养过夜。
（2）第二天添加5毫升新鲜的肉汤培养液，充分混匀后，分装2只三角瓶，继续培养5小时。
（3）将两只三角瓶的菌液分别倒入离心管中，离心（3，500转/分）10分钟。
（4）倒去上清液，打匀沉淀。其中一管吸入5毫升生理盐水，然后倒入另一离心管，二管并成一管。
2.诱变处理：
（1）吸上述菌液3毫升于培养皿内，将培养皿放在15W的紫外灯下。距离28.5厘米。
（2）处理前先开紫外灯稳定30分钟，将待处理的培养皿连盖放在灯下灭菌1分钟，然后开盖处理1分钟。照射毕先盖上皿盖，再关紫外灯。
（3）吸3毫升加倍肉汤培养液到上述处理后的培养皿中。置37℃温箱内，避光培养12小时以上。
3.青霉素法淘汰野生型：
（1）吸5毫升处理过的菌液予已灭菌的离心管，离心（3，500转/分）10分钟。
（2）倒去上清液，打匀沉淀，加入生理盐水，离心洗涤三次，加生理盐水到原体积。
（3）吸取经离心洗涤的菌液0.1毫升于5毫升无N基本培养液，37℃培养12小时。
（4）培养12小时后，按1∶1加入2N基本培养液5毫升，称取青霉素钠盐，使青霉素在菌液中的最终浓度约为1.000单位/毫升，再放入37℃温箱中培养。
（5）先从培养12、16、24小时的菌液中各取0.1毫升菌液倒在两个灭菌培养皿中，再分别倒入经融化并冷却到40－50℃的基本及完全培养基，摇匀放平，待凝固后，放入37℃温箱中培养（培养皿上注明取样时间）。
