一、实验原理
位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的。因为根据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对（或另几对）基因的分离是独立的，所以一对基因所决定的性状在杂种第二代是3∶1之比，而两对不相互连锁的基因所决定的性状，在杂种第二代就呈9∶3∶3∶1之比。

二、实验目的
1.了解两对基因的杂交方法
2.记录交配结果和掌握统计处理方法
3.正确认识二对基因自由组合的原理

三、实验材料
黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）的突变品系
黑檀体突变型，ebony（e）位于第三染色体
残翅突变型，vestigial（vg）位于第二染色体

四、实验器具和药品
双筒解剖镜，大指管，麻醉瓶，磁板，海绵板，解剖针，毛笔，镊子。

红糖，麸皮，琼脂，干酵母等。
五、实验说明
1.性状特征：黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑体（b）相似，但是它们是不同染色体上基因所决定。与（e）相对应的野生型性状是灰体。（e）的座位是第3染色体70.7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，与（vg）相对应的野生型是长翅。（vg）的座位是第二染色体67.0。
2.交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上，两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同类型配子，比例为1∶1∶1∶1，如子一代个体相互交配，则通过♀♂配子相互结合，在子二代可得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残。如下图所示：

整理后：
1++++，2+e++，2+++vg，4+e+vg，共9种［+］[+]
1++vgvg，2+evgvg，共3种［+］[vg]
1ee++，2ee+vg，共3种［e］[+]
1eevgvg，共1［e］[vg]
所以表型比例是9∶3∶3∶1。
若用反交：即♀vgvg++×++ee♂其结果应该与前面
正交相同（读者可以练习一下），但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所以作雌体亲本比较好，若作雄亲本，得到的子代将减少很多，因而在本例中反交比正交好。
六、实验步骤
1.收集雌果蝇品系的处女蝇。
2.准备好培养基，把已麻醉的残翅♀、♂果蝇和黑檀体♀、♂果蝇，按正、反交方式，分别放入不同培养瓶内，进行杂交，贴好标签，标签形式如下：

3.6—7天后，见到有F1幼虫出现，可除去亲本（除干净！）。
4.再过3－4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体、长翅（正、反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇；F1幼虫出现后亲本未倒干净；杂交时雄蝇选择有误；以及亲本原种不纯等等。

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