(二）PCR扩增
反应体系：总体积：25 μl
                 模板液                   5.0μl
                 缓冲液（含Mg2+）           2.0μl
                 dNTPs（2.5mM）          1.6μl
                 引物(10μm)             各0.8μl
                 Taq DNA聚合酶(2.5U/ml)   0.8μl
                 ddH₂O                    14.0μl
循环参数：预变性94℃   2分钟
变性94℃     30秒
退火55℃     30秒
延伸72℃     45秒
最后延伸72℃ 10分钟       共35个循环。
（三）扩增产物的鉴定：
1：制胶 将凝胶托架两端封闭并水平放置在工作台上，放上梳子，用1 ×TBE缓冲溶液配制2﹪琼脂糖凝胶液,加热溶解.注到托架上,待凝固后撤去两端封闭插片.
2:加样 将托架放入电泳槽中,加入1×TBE缓冲溶液使之没过胶面2㎜，拔出梳子,向PCR产物中加入载样缓冲液,混合.将15μl混合物加入凝胶样品孔中.载样缓冲液中有蔗糖和溴酚兰，可以增加样品比重,同时有颜色指示剂的作用。
3:电泳 加样端接负极,盖上电泳槽,接通电源,以100V电压电泳25分钟.
4:观察结果 在紫外灯下观察电泳结果.与maker400bp相对应的区带为Hbβ基因400bp片段.

五、注意事项
1：操作的整个过程中避免污染,因为PCR可以将微量的DNA进行扩增而造成假阳性
2：血红素是酶的抑制剂,必须去除干净，但在去除过程中注意勿丢失DNA。
3：加ddH2O破坏细胞核膜是关系到本实验结果好坏关键的一步,一定使核膜破坏充分,充分使DNA释放。

六、 PCR常见的问题及解决办法

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