pH对酶活性的影响
一.目的
1.了解pH值对酶促反应速度影响。
2.掌握测定唾液淀粉酶活性的原理及定性方法。
二.原理
1.酶:由活细胞产生的,对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
2.酶促反应:酶所催化的化学反应。
3.影响酶促反应速度的因素:[S]、[E]、pH、温度、激动剂与抑制剂
过酸过碱都能使酶蛋白变性而使其丧失活性。在不致使变性的pH值范围内,酶的活性会因pH值不同而不同。由于酶是一种蛋白质,在不同氢离子浓度下,其解离的情况不同,但往往只有一种情况下才是该酶的最高活力,此时pH值称为酶的最适pH值。倘若其作用条件偏离最适pH值任何方面,都将引起酶活性的降低,减慢酶促反应速度。
唾液淀粉酶能使淀粉水解成一系列比较简单的化合物,最终产物为麦芽糖,利用其与碘液的不同呈色反应,即可推知淀粉酶水解淀粉的程度和pH对唾液淀粉酶的活性影响,并可指出唾液粉酶的最适pH。
淀粉 → 紫色糊精 → 红色糊精 → 麦芽糖
(遇碘呈蓝色、遇碘呈紫色、遇碘呈红色、遇碘呈淡黄色)
制备唾液:将放一薄层棉花的漏斗置于10ml量筒顶端,5名以上的学生吐1ml唾液,倒入100ml量筒中,用蒸馏水将小量筒冲洗倒入大量筒中,加蒸馏水至100ml,用吸量管混匀唾液。
取试管3支,编号,按表加各种试剂。
摇匀放入37℃水浴中保温3分钟,用滴管吸取pH6.8管内液体一滴,在白瓷盘中用碘液检查是否水解完全,然后向各管加碘液3滴,观察结果解释之。
温度对酶活性的影响
一.目的
了解温度对酶活性的影响。
二.原理
在低温时酶的催化反应速度一般很低,温度升高催化反应速度也随之升高,但酶是一种蛋白质,升高温度可以引起蛋白质的变性,使酶的活性降低。所以温度对酶的活性有二种相反的影响,一般在比较低温范围内(例如0-40℃),温度对酶蛋白变性影响不大,活性随温度升高而增高。各种酶都有它的最适温度,此时酶表现最高的活力。机体大多数酶的最适温度在37℃—40℃。本实验利用碘与淀粉的反应,来比较唾液淀粉酶在不同温度对淀粉的水解速度


