4.染色原理
(1)化学作用 碱性染料染细胞核；酸性染料染细胞质。
(2)物理作用 染料通过毛细作用或渗透作用进入组织内部；组织吸附染料；染料进入细胞，由于吸收作用而留在细胞内部。
三、常用染料
1.染细胞核
(1)苏木精 苏木用乙醚连续提取即可得到苏木精。苏木精为黄棕色结晶，溶于酒精、甘油，可氧化生成苏木红。常用于永久切片的制作，亲水力弱，不可单独使用。
(2)卡红(洋红、胭脂红） 取自雌胭脂虫，方法是将晒干后的成虫磨碎提炼出胭脂虫红，然后用明矾去杂质。卡红是一种复杂的化合物，起作用的是卡红酸。卡红在中性溶液里溶解度很小，所以要用酸性或碱性溶液溶解。
醋酸洋红： 45%醋酸100ml与1-2g卡红混合，煮沸，充分溶解，凉后过滤。1-2个月后加媒染剂铁即可使用。主要染细胞核，若时间太长，细胞质也被染红。
(3)碱性品红 染细胞核的特异染料。
2.染细胞质 伊红Y、刚果红、苦味酸、酸性品红（品红+磺基）
四、洋葱根尖有丝分裂的观察
流程：固定好的根尖→水洗2-3次→1N HCl7-8min→水洗2-3次→取材(1/2分生区)→切碎→染色6-7min→加盖玻片→轻敲→压片→观察。
1.材料准备：将洋葱放在加满水的广口瓶上，使其根茎部接触水面，然后转移到25-28℃的条件下培养。待根尖长到2cm左右使，在上午9-10点剪取根尖备用。
2.预处理：为了有利于对有丝分裂过程中染色体的观察和计数，在固定前应对根尖进行预处理，这样可以改变细胞质的粘度，破坏和抑制纺锤体的形成，使染色体适度缩短和分散。预处理的方法有低温预处理和药物预处理。
(1)低温预处理 将材料浸在蒸馏水中，放在1-4℃冰箱内离体处理24h。此法效果很好，对染色体无破坏作用，染色体缩短均匀，简便易行，各种作物都适用。
(2)药物预处理
①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h，对抑制纺锤体活动效果明显，易获得较多的中期分裂相，且染色体收缩较直，有利于染色体结构的研究。
②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h，对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好，但对染色体小而多的植物来说个利于染色体的计数。
③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h，可以引起细胞粘度的改变，导致纺锤体活动受阻，使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。缢痕区也较为清晰。一般认为对中等或长染色体的植物较合适。
④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件下，根尖不离体处理5h，可获得大量的分裂相，是最值得首选的预处理方法。
3.固定：:预处理后的根尖用蒸馏水冲洗2-3次，然后移入Carnoy’s固定液中，室温下固定2-24h后，用70%酒精冲洗2次转入70%酒精中于4℃冰箱中保存，最好不要超过2个月。如经过较长时间保存的材料，在使用前可以用固定液在处理一次。
4.解离：解离有酸解和酶解两种方法，可以使分生区组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易压平。酸解一般用1N HCl在60℃水浴中处理7-8min即可。
5.压片和染色：取处理好的根尖置于载玻片上，用吸水纸吸去多余的液体，用刀片将根尖的分生组织切下并切碎，加1-2滴改良苯酚品红染液，6-7min后加盖玻片。用铅笔的橡皮头或小镊子的柄端轻敲盖玻片，使材料均匀分散，然后压片。压片时用力要适当，不要移动盖玻片。
6.镜检：低倍镜下找到分生区细胞，其特点为等直径细胞。细胞质浓厚，细胞核较大，占细胞体积的3/4。可以观察到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体。选取不同分裂时期的典型细胞，换高倍镜观察，注意细胞核染色体及纺锤体的变化动态。
注意事项：
(1)取材：取分生区，尽量要小；(2)解离要软，水洗要彻底，否则不易着色；(3)压片前先敲，可使细胞分散开；(4)防止出气泡。
