四.  试剂的配制
1.  NaCl溶液（C.P.）（10%）
2.  HCl溶液（6N）
取500mL浓盐酸，用水稀释至1000mL。
3.  乙醇（C.P.）（95%）
4.  苔黑酚试剂（又称地衣酚试剂）
将200mg苔黑酚溶于100mL浓盐酸中，再加入100mg FeCl₃·6H₂O。
（低温贮藏一周）
5.  二苯胺试剂
将1g二苯胺溶于98mL冰醋酸中，再加入2mL浓硫酸（比重1.84）。
（临用时配制，用前可加几滴乙醛。）
五.  操作步骤
1.  取材
在天平上准确称取干酵母3.00g，转移至100mL锥形瓶中。
2.  浓盐浸提
取27mL 10%NaCl溶液，加入到含干酵母的锥形瓶中，搅拌均匀；置于90～100°C水浴中，浸提30～60分钟；冷却。
3.  离心
将锥形瓶中提取液和沉淀全部转移至100mL离心管中，取10mL H₂O洗涤锥形瓶，并入离心管中；平衡后以4000转/分钟离心15分钟；将上清液（即RNA提取液）倾入50mL烧杯中，弃去沉淀（菌体残渣）。
4.  沉淀RNA
(1)  冷却：将50mL烧杯置于放有冰块的250mL烧杯中冷却；将温度计插入50mL烧杯中，待溶液冷至10°C以下时，取出温度计。
(2)  调pI：缓慢滴加6NHCl于50mL烧杯中，用玻棒一边轻轻搅拌溶液，一边测量pH值，调节溶液pH至2.0～2.5范围，溶液中白色沉淀逐渐增多，到等电点时沉淀量最多；继续在冰浴中静止15分钟，使沉淀充分。
（注意：①严格控制pH；②若搅拌过快核酸难以凝聚沉淀。）
5.  离心
将小烧杯中溶液和沉淀移至离心管中，再次平衡、离心（4000转/分钟，15分钟）；弃去上清液，保留RNA沉淀。
6.  洗涤与抽滤
(1)  洗涤：取10mL 95%乙醇加到含RNA沉淀的离心管中，悬浮沉淀，浸泡5分钟。
(2)  抽滤：取大小合适的滤纸，先在数字显示天平上称重；然后放入布氏漏斗中，用少量乙醇湿润滤纸，开启真空泵，使滤纸贴紧漏斗，将沉淀及溶液全部转移至布氏漏斗内；再用15mL 95%的乙醇洗涤离心管，淋洗滤渣。
7.  干燥
用小镊子取出布氏漏斗中的沉淀物和滤纸，转移至表面皿上，置于80°C烘箱内干燥。
8.  称重
取出样品，在室温下冷却数分钟后，将沉淀物及滤纸置于数字显示天平上称重。
9.  颜色反应
(1)  溶解：取50mL水溶解RNA沉淀，同时加2滴NaOH助溶。
颜色反应：取4支洁净、干燥的试管，按下表所示顺序操作

六.  结果处理
1.  写出核酸产品的颜色和外形。
2.  计算RNA的粗产品的得率。
3.  由颜色反应的结果，说明产品中含有核酸的情况。

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