一.  目的

通过电化教学方式学习分光光度计的工作原理
掌握比色测定的基本操作方法

二.  原理

光线的本质是电磁波的一种，有不同的波长。肉眼可见的彩色光称为可见光，波长范围在400～750nm：小于400nm的光线称为紫外光；大于750nm的光线称为红外光。

当光线通过透明溶液介质时，其辐射的波长有一部分被吸收，一部分透过、因此光线射出溶液之后，部分光波减少，这种光波的吸收和透过可用于某些物质的定性定量分析。

其中：T：透光率                            A：吸光度（有时用光密度OD表示）
         I： 透射光强度               I0：入射光强度
         K：吸收系数                   L：溶液的光径长度
         C：溶液的浓度
 
从上式可以看出，一束单色光通过溶液后，光波被吸收一部分，其吸收多少与溶液中溶质的浓度和溶液厚度成正比，当入射光、吸收系数K和溶液的光径长度L不变时，吸光度A与溶液的浓度C成正比。

三.  实验材料及设备
1.  仪器
分光光度计  放相机  电视机
2.  器材
普通试管：  20mL×3
移 液 管：  5mL×2
烧    杯：  250mL×1
洗 耳 球：  2
洗瓶、试管架、移液管架：各1 

四.  试剂的配制
重铬酸钾（K₂Cr₂O₇）溶液（0.2mg/mL）
称取0.2g K₂Cr₂O₇，蒸馏水溶解后定容至1000mL。

五.  操作步骤
1.  在电教室中看录像
了解721型分光光度计的工作原理。
2.  在分光光度室中练习操作
详细步骤见附录六。
3.  在实验室中应用练习
取3支试管，按下表所示顺序操作。


六.  结果处理
1.  求两个样品管A450的平均值
2.  计算重铬酸钾的摩尔消光系数。