实验目的：掌握PCR反应的基本原理与实验技术
实验原理：PCR( Polymerase Chain Reaction)-聚合酶链式反应，可以选择性扩增一段DNA序列。其基本步骤是，首先将待扩增的模板DNA变性使之成为单链， DNA样品中，特异性的引物能够与其互补的序列杂交，在dNTPs和Taq酶存在时，就可以合成模板DNA的互补链，反应完成后，将反应混合物加热使DNA双链变性，温度下降后，过量的引物又可以开始第二轮的合成反应。这种延伸—变性—退火—延伸的循环可以重复多次，使所需要的DNA片段得到特异性的扩增。
1.变性：加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链间的氢键断裂而形成两条单链.
2. 退火：使溶液温度降至50～60℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合.
3.延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合
物中的4种脱氧核苷三磷酸（dNTPs），按5ˊ→3ˊ方向复制出互补DNA.上述3步为一个循环，即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。从理论上讲，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25～30个循环后DNA可扩增106～109倍。典型的PCR反应体系由如下组分组成：DNA模板、反应缓冲液、dNTP、MgCl2、两个合成的DNA引物、耐热Taq聚合酶。
仪器、实验用品、试剂 一、仪器 PCR仪 冰箱 电泳仪 微波炉 电泳槽 离心机 紫外检测仪 二、试剂 PCR Buffer TAE(500ml) Ice 琼脂糖 Tag 溴化乙锭 d NTPs 溴酚蓝 模板DNA marker Primer1 Primer2 石蜡油 三、其它用品 移液器 （一套） Tip（一套） PCR管 (0.2ml) 防护眼镜 一次性手套 胶带
四\实验步骤
时间安排：
上午 10：30 配反应体系
中午 PCR
下午 电泳
PCR（范提供）反应体系
