生物秀首页 新闻前沿 产业资讯 实验技术 仪器教程 生物考研 资源下载 生物人 物秀商城 生物论坛 图片 专业 博客 易生物 视频动画
生命科学实验中心
导航: 生物秀 > 实验 > 微生物实验 > 实验技术 > 正文
  • 倾力提供最优!
  • 生物秀实验频道
肠道杆菌的鉴定
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-9-10

    (1)单糖发酵试验:
    ①原理:各种细菌含有不同的糖(醇)分解酶,分解糖(醇)的能力不同,代谢产物也不同,有的产酸、有的尚有气体形成。因此可协助鉴别细菌,尤其是肠道细菌;
    ②单糖发酵管的制备:将1.6%的溴甲酚紫水溶液1ml加入PH7.6的蛋白胨水1000ml中摇匀。每200ml为一份,分装到已标好葡、乳、麦、甘、蔗等字样的五个锥形瓶中。在五瓶液体中分别加入五种糖,糖的最终浓度为1%。将五种糖培养基分别装入已备有小倒管的试管中,每管约3­~4ml。经68.95kPa高压灭菌15分钟后备用。
    ③方法与结果:用灭菌接种环分别取大肠杆菌和伤寒杆菌少许,分别接种于五种糖发酵管,经37℃培养18~24小时,观察结果;
    ⅰ.糖不分解,指示剂仍为紫色,记录方式(—);
    ⅱ.糖分解(产酸不产气)指示剂变黄,小倒管中无气泡,记录方式(+);

    (2)靛基质(吲哚)试验:
    ①原理:各种细菌分解氨基酸的能力不同,借此可鉴别菌种。有些细菌如大肠杆菌、变形杆菌等具有色氨酸分解酶,可分解蛋白胨中的色氨酸生成无色的吲哚——即靛基质,当加入靛基质试剂(对二甲基氨基苯甲醛),形成玫瑰色吲哚,可用肉眼观察。
    ②蛋白胨水培养基的制备:将蛋白胨1g、NaCl0.5g加入蒸馏水100ml,调pH值为7.6,分装试管,每管约3­~4ml。经68.95kPa高压灭菌15分钟后备用。
      ③方法与结果:用灭菌接种环分别取大肠杆菌、伤寒杆菌少许接种于蛋白胨水培养基中,经37℃培养24~48小时。取出培养物后,加入2­~3滴乙醚,混匀静置(使无色吲哚和乙醚一并上升至液体表面),再沿管壁加入2­~3滴靛基质试剂于培养物表面,在两者接触面上呈玫瑰红色为阳性,黄色为阴性。
    (3)硫化氢试验:
       ①原理:有些细菌如变形杆菌、副乙型伤寒杆菌等能分解含硫氨基酸(胱氨酸等)生成硫化氢,如培养基中含有铅盐(如醋酸铅)或者铁盐(如硫酸亚铁),硫化氢可与之结合生成黑褐色的沉淀物。
      ②醋酸铅培养基的制备:将醋酸铅0.5g、硫代硫酸钠0.25g等加入到500ml2%的肉汤琼脂中,调PH值为7.4~7.6, 分装试管,每管约3­~4ml。经68.95kPa高压灭菌15分钟后备用。
    ③方法与结果:用灭菌接种针分别取大肠杆菌、变形杆菌少许穿刺接种于醋酸铅培养基中, 经37℃培养24小时。沿穿刺线部位呈现黑色为阳性,无黑色出现为阴性。
    (4)色素的产生:
    原理:有些细菌在代谢过程中,可合成不同颜色的色素,有利于细菌的鉴定。
    色素分为两类:脂溶性色素:仅菌落本身着色,培养基不染上颜色。
    水溶性色素:色素本身可溶解,渗透到周围的的培养基中。
    细菌的色素,在室温、有氧、含血清、牛乳等培养基中产生丰富。
       方法:观察两种细菌的色素,其颜色、特性等。
    实验报告:
    1.记录上次双糖铁培养基、半固体培养基接种的结果(绘图并分析);
    2.记录玻片凝集试验的结果(绘图并分析);
    3.结合肠道致病菌的系列检查结果作出最后鉴定。
    4. 记录细菌代谢产物的观察结果(绘图并简要分析):
     单糖发酵试验、硫化氢试验、吲哚试验。

    上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] 

关于〖肠道杆菌的鉴定〗的最新评论
昵称:      评分: 1分 2分 3分 4分 5分
内容:
生物秀实验频道
设为首页 | 加入收藏 | 关于我们 | 战略伙伴 | 友情链接 | 法律声明 | 广告服务 | 联系我们 | 网站地图
Copyright © 2003-2008 生物秀 (中国·生物秀科技) 版权所有 信产部备案:鲁ICP备05001831号
客服信箱:info@bbioo.com  客服电话:15800302289  客服QQ:254857951
www.bbioo.com All Rights Reserved.