肠道杆菌的鉴定（二）
实验内容：
1. 观察上次实验结果
在SS平板上的2~3区可看见散在的沿划线分布的大小不同、两种颜色的菌落。
一种是较大的红色菌落，另一种是较小的半透明的淡黄色或无色的菌落。较大的红色菌落是肠道致病菌，较小的半透明的淡黄色或无色菌落是肠道致病菌。详见表8-1。
表8-1 大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌的生物学特征
2．双糖铁培养基的接种
从SS培养基上挑取较小的无色或淡黄色菌落，可先做革兰氏染色镜检，然后再接种于双糖铁培养基中（为观察比较，同组四人应取大小或颜色不同的两个菌落分别接种于两支双糖铁，并作好标记）。
方法：（即实验五介绍的半固体接种法和斜面接种法的结合）
①用接种针以无菌操作技术挑取标本，立即垂直插入培养基中心至接近管底处，再循原路退出到斜面上；
②接种针自斜面最低处向上划一直线（要求通过试管培养基的中心点），然后再从斜面低处向上轻轻来回作蜿蜒划线；
③接种完毕，盖好试管塞。贴上标签纸。
37℃培养18~24小时，取出观察结果并分析（参照表8-1）
附：双糖铁培养基：蛋白胨20g，牛肉膏3g，酵母膏3g，乳糖10g，葡萄糖1g，氯化钠5g，柠檬酸铁铵0.5g，硫代硫酸钠0.5g，琼脂12~15g，4g/L酚红水溶液6ml，蒸馏水1000ml。除糖类和酚红外，其他各成分均加热溶解，矫正pH至7.4~7.6，再加入糖类和酚红水溶液，混匀，过滤分装，每管3ml，68.95kPa灭菌15min，取出后制成斜面，斜面和底层各占1/2。
3．半固体培养基的接种
另从SS培养基上挑取较小的无色或淡黄色菌落，可先做革兰氏染色镜检,然后再接种于半固体培养基中（为观察比较，同组四人应取大小或颜色不同的两个菌落分别接种于两支半固体培养基，并作好标记）。
方法：详见实验五细菌的分离和培养中的半固体接种法。
