ⅶ）按10、9、8…1列的顺序，分别对第1行各孔加入0抗原1滴；第2行各孔加入H抗原1滴；同样对第3行各孔加甲型副伤寒（PA）H抗原1滴；第4行各孔加乙型副伤寒（PB）H抗原1滴。由于抗原（菌液）的加入量少，可忽略不计。
ⅷ）将各孔混匀，置37℃水浴箱中2小时，取出置室温过夜，次日观察，判断并分析结果。
③结果观察（见图7-1）：
根据凝集反应的强弱，分别以“++++、+++、++、+”记录：
++++：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。
+++：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。
++：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物。
+：液体较混浊，可见极少量凝集物。
-：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点（与对照管相似）。
血清效价（或滴度）：能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集（即“++”凝集）的血清最高稀释倍数，称为血清的效价。血清的效价代表着血清中抗体的含量，其效价愈高，所含抗体的量愈多。如血清最低稀释倍数（1∶40）仍无凝集，则视为阴性或效价低于1∶40；如血清的最高稀释倍数（1∶1280）仍完全凝集，则示血清效价高于1∶1280。
④结果分析：
ⅰ）首先应考虑当地正常人效价（正常效价）。一般以单份血清凝集效价：0效价应达1：80以上、H效价应在1：160以上，PA和PB应达1：40以上方有诊断价值；若病程中第2次血清效价比第1次高4倍以上亦有诊断价值。
ⅱ）由于H凝集素在血内保持时间较久，0凝集素较短暂，所以曾接种过伤寒、副伤寒菌苗者，0凝集效价在诊断上较重要。
ⅲ）真正的伤寒病人，0凝集素常较H凝集素出现早、但维持时间较短；H凝集素出现较晚、但效价较高且持续时间较长。
ⅳ）回忆反应：过去曾接种过伤寒、副伤寒菌苗或患过伤寒、副伤寒病，近期又发生感染如流感、肝炎、结核病等，可非特异地产生较高的H凝集素和较低的0凝集素，此现象称为回忆反应。
ⅴ）若0效价高而H不高（对正常效价而言），则可能是感染早期或与伤寒杆菌0抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。
ⅵ）确诊为伤寒的患者中，约有10%的患者该试验始终阴性或效价不高，故阴性结果不能排除伤寒的诊断。
ⅶ）采血时间不同，肥达式反应的阳性率也不同。发病第1周约为50%；第2周80%；第4周90%以上。恢复期效价最高，以后逐渐下降，直至转阴。一般以双份血清（急性期和恢复期）对比，效价有明显上升者作为新近感染的指征。
1. 观察大肠杆菌（或痢疾杆菌/伤寒杆菌）革兰氏染色形态示教片
