4. PCR—SSP技术
序列特异引物—PCR(Sequence Specific Primer PCR，PCR—SSP)：是根据基因座某一碱基的差异设计一系列引物，在确定某一碱基为该等位基因所特有的基础上设计一对引物，两引物3’端的第——个碱基均与等位基因特异碱基互补，特异性引物仅扩增与其相应的等位基因，而不扩增其他的等位基因。因此，PCR扩增产物的有无是鉴定特异性等位基因的基础，这种特异性的PCR扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳检出。该方法操作简单快速，实验结果容易判断，杂合子也很易于检出，已应用于HLA-DRB的分型中。不足之处在于，为检出所有的等位基因，必须用多个引物进行扩增。
第一步：靶基因的扩增
第二步：与探针杂交并冲洗
第三步：染色
第四步：探针反应格局(结果)的分析
图1-1反向斑点杂交原理示意图
图1-2 HLA-B基因座反向斑点杂交结果
图1-3 HLA-SSP分型结果
