（一）形态观察
1. 大肠杆菌（革兰氏染色标本）革兰氏染色阴性，中等大小球杆菌，两端纯圆，呈现分散排列。
2. 伤寒杆菌（革兰氏染色标本）革兰氏染色阴性，中等大小球杆菌，散在分布。
3. 痢疾杆菌（革兰氏染色标本）革兰氏阴性杆菌。
（二）培养特性
1. 大肠杆菌：在普通琼脂平板上形成圆形、中等大小、灰白、半透明，边缘整齐光滑之菌落，有特殊气味。在EMB平板上菌落呈现紫黑色，有金属光泽。在MCK平板上菌落呈红色。
2. 伤寒杆菌：在普通琼脂平板上菌落为园形，中等大小、灰白、半透明，边缘整齐、表面光滑。在EMB平板上，菌落较小，无色半透明。在MCK平板上菌落较小，无色半透明。
3. 痢疾杆菌：菌落特征同伤寒杆菌。
二、粪便标本中肠道病原菌分离鉴定
粪便中的细菌种类很多，要检出病原菌，通常应用具有选择性或鉴别性的培养基，其特点是此类培养基中除含有细菌所需的营养物质外，还含有抑菌剂和指示剂。可选择性的抑制沙门氏杆菌和痢疾以外的其它肠道杆菌生长，指示剂则可用以鉴别细菌的生化特性。其检验程序如下。
（一）标本采集
采取标本时应注意病情和病程，尽量在未使用抗菌素之前，选取脓血或粘液部分。取材后应立即送检。如不能立即送检，可将本本保存于30%甘油缓冲盐水中。
（二）分离培养
【材料】
EMB平板，MCK平板。
【方法与结果】
用接种环挑取少量粪便标本，以分离划线法接种于EMB平板或MCK平板上，置37℃培养18-24小时，观察平板上的菌落，依据其大小，透明度和颜色等特点，初步识别可疑致病菌和非致病菌菌落。
三）初步鉴定
【材料】
双糖铁培养基
【方法与结果】
将可疑菌落接种于双糖铁培养基中，经37℃培养18-24小时，观察培养基变化。
