二、影响病毒载量测定结果的因素
1 标本类型
血浆和血清标本都可用来测定病毒载量，用三种测定方法进行比较都发现血清和血浆测定的结果有高度相关性。但是血清的检测结果大约是血浆的50%（ 30-80% ），可能是因为血液凝固的过程中HIV颗粒被包裹在纤维蛋白网络中，导致血清中病毒的浓度下降。因此，测定病毒载量应该首选血浆标本，血浆也是临床使用的唯一标本。血清标本对于研究也是可以接受的，重要的是每位病人使用的标本类型应始终保持一致。
2 抗凝剂
抗凝剂能够显著影响测定的结果。肝素钠处理的血浆不适合做Amplicor HIV-1 Monitor试验，因为肝素是PCR反应的一个潜在的抑制剂。如果必须用RT-PCR方法测量肝素处理的血浆，可以向标本中加入肝素酶以分解肝素。另外，肝素处理的血浆中病毒颗粒降解的速率显著高于EDTA钠盐和枸橼酸钠处理的血浆，一般情况下不同抗凝剂处理的血液6小时之内HIV RNA的降解速率分别是1.8%/小时（EDTA）、3.3%/小时（枸橼酸钠）和5.0%/小时（肝素）。在血液处理方法相同的条件下，用EDTA钠盐抗凝的血浆结果显著优于枸橼酸钠和肝素，因此EDTA钠盐是首选的抗凝剂。
3 标本处理时间和温度
HIV-1在体内进行快速转换，平均半衰期是大约6个小时。HIV-1在体外未处理的全血中也快速降解，全血中HIV RNA的降解速率在6小时之内平均是9%（0.04log）,最大的降解速率是在采血以后6-8小时，采血以后30小时内可能减少0.5log。因此为了减少病毒颗粒降解对检测的影响，应该在采血以后6小时之内分离血球和血浆，如果做不到就应该使用血浆分离管，立即离心4℃存放，需要保存30小时以上就应该放在-70℃。
温度对HIV RNA的影响不显著。-70℃～室温反复冻融3次，HIV RNA变化的幅度小于0.2log。-70℃保存5个月，HIV RNA减少0.3-0.5log，-70℃保存12个月，HIV RNA减少一般不超过0.4log。血浆在室温或4 ℃保存3天，HIV RNA减少不超过0.5log。
三、病毒载量测定结果的分析和解释
分析一个病人不同时间病毒载量测定的结果时，首先要考虑测定结果的变化是真实的生物学改变还是方法本身的变异或误差。
大量比较研究显示病毒载量测定商品化试剂盒的精密度是大约0.2-0.5log（1.7-3倍），在不同的检测动态区域有所不同，相对来说在低病毒载量区域的变异更大，如某实验室测定高滴度样品（4.0-5.7log）的标准差是0.20log，测定低滴度样品（2.6-3.9log）的标准差达到0.22log，临床稳性的病人病毒载量每日的变化大约是0.4log（2.5倍）。因此病毒载量的变化超过0.5log（大约是3倍）就超过了实验和每日的正常变化，应被视为有生物学意义的变化，而0.5log以内的变化就很难与随机的变异相区分。特别需要注意的是在接近检测下限的时候，实验的变异对于解释病毒载量变化的意义有更大的影响。例如，病毒载量从50cp/ml增加到150cp/ml，虽然变化的幅度达到0.5log，但真正反映的可能是实验的变异而不是抗病毒治疗的失败，因此对于接近检测下限的测定结果需要进行认真分析。
四、病毒载量测定的质量管理
核酸检测的显著优点是高度敏感性，这反过来增加了污染和取样误差的危险，方法本身的复杂性也增加了系统和随机误差。试剂昂贵的价格限制了技术人员对方法的熟悉、对试剂的评价和对仪器的研究，这些都增加了出现错误和误差的危险（表2）。要认真分析这些因素，确定重点监控对象，同时应避免过份纠缠没有临床意义的细小误差。
艾滋病检测实验室通用的质量保证、质量控制和质量评价原理和方法适用于HIV病毒载量检测。
1 质量保证
质量保证指从接收样品到发出报告的整个过程中，为确保最终结果的正确性所采取的全部措施。质量保证是质量管理的基础，包括质量控制和其他所有为确保检测质量所采取的一切活动。病毒载量测定的质量保证可采取与其他检测相同的基本措施，在这个基础上，增加其他一些必要的步骤（表3）。
表2 病毒载量测定的主要误差来源
