Ⅲ级生物安全柜
Ⅲ级生物安全柜（图9）用于操作危险度4 级的微生物材料，可以提供最好的个体防护。Ⅲ级生物安全柜的所有接口都是“密封的”，其送风经HEPA 过滤，排风则经过两个HEPA 过滤器。
Ⅲ级生物安全柜由一个外置的专门的排风系统来控制气流，使安全柜内部始终处于负压状态（大约124.5 Pa）。只有通过连接在安全柜上的结实的橡胶手套，手才能伸到工作台面。Ⅲ级生物安全柜应该配备一个可以灭菌的、装有HEPA 过滤排风装置的传递箱。Ⅲ级生物安全柜可以与一个双开门的高压灭菌器相连接，并用它来清除进出安全柜的所有物品的污染。可以将几个手套箱连在一起以增大工作面积。Ⅲ级生物安全柜适用于三级和四级生物安全水平的实验室。
生物安全柜的通风连接
A1 型和外排风式A2 型Ⅱ级生物安全柜的设计使用了“套管（thimble）”或“伞形罩（canopy hood）”连接。套管安装在安全柜的排风管上，将安全柜中需要排出的空气引入建筑物的排风管中。在套管和安全柜排风管之间保留一个直径差通常为2.5 cm 的小开口，以便让房间的空气也可以吸入到建筑物的排风系统中。建筑物排风系统的排风能力必须能满足房间排风和安全柜排风的要求。套管必须是可拆卸的，或者设计成可以对安全柜进行操作测试的类型。一般来讲，建筑物气流的波动对套管连接型生物安全柜的功能不会有太大的影响。
级B1 型和 级B2 型生物安全柜通过硬管，亦即没有任何开口地、牢固地连接到建筑物的排风系统，或者最好是连接到专门的排风系统。建筑物排风系统的排风量和静压必须与生产商所指定的要求正好一致。对硬管连接的生物安全柜进行认证时，要比将空气再循环送回房间或采用套管连接的生物安全柜更费时。
生物安全柜的选择
主要根据下列所需保护的类型来选择适当的生物安全柜：实验对象保护；操作危险度1～4 级微生物时的个体防护；暴露于放射性核素和挥发性有毒化学品时的个体防护；或上述各种防护的不同组合。表8 列出了每一种防护类型所推荐使用的生物安全柜。
操作挥发性或有毒化学品时，不应该使用将空气重新循环排入房间的生物安全柜，即不与建筑物排风系统相连接的Ⅰ级生物安全柜，或 级A1 型及 级A2 型生物安全柜。Ⅱ级B1 型安全柜可用于操作少量挥发性化学品和放射性核素。Ⅱ级B2 型安全柜也称为全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和挥发性化学品时，必须使用这一类型的安全柜。
实验室中生物安全柜的使用
位置
空气通过前面开口进入生物安全柜的速度大约为0.45 m/s。这样速度的定向气流是极易受到干扰的，包括人员走近生物安全柜所形成的气流、打开窗户、送风系统调整以及开关门等都可能造成影响。因此，最为理想的是，生物安全柜应位于远离人员活动、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。在安全柜的后方以及每一个侧面要尽可能留有30 cm 的空间，以利于对安全柜的维护。在安全柜的上面应留有30～35 cm 的空间，以便准确测量空气通过排风过滤器的速度，并便于排风过滤器的更换。
