6. 酚／氯仿（1：1）溶液配制
（1）将商品苯酚置65℃水浴上缓缓加热融化，取200mL融化酚加入等体积的1mol/L Tris-HCl pH8.0缓冲液和0.2g (0.1%)8－羟基喹啉，于分液漏斗内剧烈振荡，避光静置使其分项。
（2）弃去上层水相，再用0.1mol/L Tris－HCl缓冲液pH8.0与有机相等体积混匀，充分振荡，静置分相，留取有机相。
（3）配制氯仿／异戊醇混合液：将24份氯仿与1份异戊醇混合均匀。
（4）等体积的酚和氯仿／异戊醇溶液混合。放置后，上层若出现水相，可吸出弃去。有机相置棕色瓶内低温保存。
7. TE缓冲液(10mmol/L, pH8.0 Tris-HCl, 1mmol/L EDTA)
称取0.12g Tris，加适量蒸馏水溶解，用1mol/L盐酸调至pH8.0并定容至100mL，加入0.037gEDTA·Na2·2H2O。临用前加入核糖核酸酶，为了使RNase制剂中混杂的DNase失活，临用前80℃处理10min。
8. 无水乙醇及70％乙醇。
二、材料
携带pBR322质粒的大肠杆菌。
三. 器材：
试管，Eppendorf管，移液器，恒温振荡器，高速台式离心机，冰块，接种环，旋涡混合器。
操作方法
一、碱裂解法
1. 培养细菌扩增质粒
将携带pBR322质粒的大肠杆菌接种于含2 ~ 5mL 氯霉素的LB液体培养基中，37℃摇床培养24h左右。
2. 收集菌体和裂解细菌
（1）取1.5mL培养液置Eppendorf管内，离心，10000r/min，5min，弃去上清，保留菌体沉淀。如菌量不足可再加入培养液，重复离心，收集菌体。
（2）将菌体沉淀悬浮于预冷的150μl TEG缓冲液内，剧烈振荡、混匀，室温放置10min。
（3）加入200μl新鲜配制的碱裂解液，加盖，颠倒数次轻轻混匀，冰上放置5min。
