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酶的抑制剂与激活剂及温度对酶活性的影响
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-9-7
    一、目的和要求:
    1、加深对酶性质的认识
    2、了解酶促反应的激活与抑制,学习检测激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。
    二、实验原理:
        酶的活性常受到某些物质影响,有些物质能增加酶的活性,称为酶的激活剂;另一些物质则降低酶的活性,称为抑制剂。
        很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特异性(值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂,而在高浓度时则成为该酶的抑制剂,NaCl是唾液淀粉酶的激活剂,但NaCl浓度到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性)。
        酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最大,大多数动物酶的最适温度为37-40℃。植物酶的最适温度为50-60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关,有些酶的干燥剂,虽加热到100℃,其活性并无明显改变,但在100℃的溶液中却很快的完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
     
    三、操作方法
     
    1、酶的激活剂与抑制剂

    [注]保温时间根据个人唾液淀粉酶活力调整
     
    2、温度对酶活力的影响
    淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色,紫色,暗色或红色。最简单的糊精遇碘不呈蓝色。麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。
    取3支试管,编号后按下表加入试剂,摇匀,将2号、3号两试管放入37℃恒温水浴中,1号管放入冰水中,10分钟后取出,(将1号管内液体分为两半)用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果,将1号管中剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10分钟后,再用碘液检验,结果如何?

    管号

    材料

    预处理

    加底物

    处理

    检测

    1

    1ml

    酶液

    冰浴5分钟

    每管加入0.2%淀粉1.5ml

    冰浴10分钟

             一半在37

    分两半   水浴10分钟  I21-2

             一半不处理

    2

    1ml

    酶液

    /

    37℃水浴

    10分钟

    I21-2

    3

    1ml

    酶液

    沸水浴5

    分钟

    37℃水浴

    10分钟

    I21-2

    四、试剂
    (1)稀200-500倍的新鲜唾液
    (2)0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液,需新鲜配制
    (3)碘化钾-碘溶液,20克碘化钾及10克碘溶于100毫升蒸馏水中,用前稀释10倍。
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