NaN3，流速1ml/cm2/hr。
1. 过氧化氢酶（210 000）
2. 醛缩酶（158 000）
3.牛血清蛋白（67 000）
4.卵清蛋白（43 000）
5.糜蛋白酶原A（25 000）
6.核糖核酸酶A（13 700）
凝胶过滤除用于生物大分子的分离、分子量测定外，还可用于提纯、脱盐和复合物组分成分分析等。
适用于做凝胶过滤的材料有多种，主要有葡聚糖凝胶颗粒(Sephadex G)、琼脂糖凝胶颗粒(Sepharose)和聚丙烯酰胺凝胶颗粒(Bio Gel)等。现将这些凝胶颗粒的种类和某些应用数据列于表3-2。
不论何种凝胶，其共同特点是化学性质稳定，不带电，与待分离物质吸附力很弱，不影响待分离物质的生物活性，样品得率可达100%，凝胶过滤尚有操作简便，凝胶柱不经特殊处理便可反复使用等特点，是近年来被广泛应用的生化技术之一。
表3-2 一些凝胶过滤用凝胶颗粒
五、亲和层析(Affinity Chromatography)
亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。许多物质都具有和某化合物发生特异性可逆结合的特性。例如：酶与辅酶或酶与底物（产物或竞争性抑制剂等），抗原与抗体，凝集素与受体，维生素与结合蛋白，凝集素与多糖（或糖蛋白、细胞表面受体），核酸与互补链（或组蛋白、核酸多聚酶、结合蛋白）以及细胞与细胞表面特异蛋白（或凝集素）等。亲和层析法就是利用化学方法将可与待分离物质可逆性特异结合的化合物（称配体）连接到某种固相载体上，并将载有配体的固相载体装柱，当待提纯的生物大分子通过此层析柱时，此生物大分子便与载体上的配体特异的结合而留在柱上，其他物质则被冲洗出去。然后再用适当方法使这种生物大分子从配体上分离并洗脱下来，从而达到分离提纯的目的（图3-10）。
亲和层析由于是配体与待分离物质进行特异性结合，所以分离提纯的效率极高，可提高纯度几千倍，是当前最为理想的提纯和浓缩方法。亲和层析的配体与待分离物质特异性结合性质还可用来从变性的样品中提取出其中未变性的部分，从大量污染的物质中提纯小量所需成分，亲和层析还可用来从极度稀薄的液体中浓缩其溶质。
亲和层析所用的载体和凝胶过滤所要求的凝胶特性相同，即化学性质稳定，不带电荷，吸附能力弱，网状疏松，机械强度好，不易变形，能保障流速的物质。聚丙烯酰胺凝胶颗粒、葡聚糖凝胶颗粒以及琼脂糖凝胶颗粒都可用，其中以琼脂糖凝胶(Sepharose 4B)型应用最广泛。亲和层析的关键是设法选择合适的配体，并将此配体与载体以化学方法连接起来，形成稳定的共价键，这需要在实际工作中根据需要加以选择和试验。
常用词汇
吸附层析 Apsorption Chromatography
洗脱 Elution
固定相 Stationary Phase
分配系数 Partition Coefficient
阳离子 Cation
阴离子 Anion
树脂 Resin
DEAE纤维素 Diethylaminoethyl Cellulose
葡聚糖凝胶 Sephadex Gel
pH梯度 pH Gradient
