二、透析和超滤 (Dialysis and Ultrafiltration)
1、透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜而进行纯化的一种方法。脱盐透析是应用最广泛的一种透析方法。将含盐的生物大分子溶液装入透析袋内,将袋口扎好放入装有蒸馏水的大容器中，并不断搅拌使蒸馏水保持流动。经过一段时间后，小分子盐类透过半透膜进入蒸馏水中（图1-1），使膜内外盐浓度达到平衡。如在透析过程中更换几次大容器中的液体，可以达到使生物大分子溶液脱盐的目的。平衡透析也是常用的透析方法之一。方法是将装有生物大分子的透析袋装入盛有一定浓度的盐溶液或缓冲液的大容器中，经过透析，袋内外的盐浓度或缓冲液pH一致，从而有控制地改变被透析溶液的盐浓度或pH。
如将透析袋放入高浓度吸水性强的多聚物溶液中，透析袋内溶液中的水便迅速被袋外多聚物所吸收，从而达到使袋内液体浓缩的目的。这种方法称为“反透析”。可用做反透析的多聚物有聚乙二醇（Polyethylene Glycol, PEG）、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyl Pyrolidone, PVP）、右旋糖、蔗糖等。透析用的半透膜种类很多，玻璃纸、棉胶、动物膜、皮纸等都可用来制作透析袋。
2、超滤法是利用具有一定孔径的微孔滤膜，对生物大
分子溶液进行过滤（常压、加压或减压），使大分子保留在超滤膜上面的溶液中，小分子物质及水过滤出去，从而达到脱盐、更换缓冲液或浓缩的目的。这种利用超滤膜过滤分离大分子和小分子物质的方法叫做超滤法（图1-2）。 三、减压浓缩冷冻干燥
因为生物大分子通常遇热不稳定，极易变性，浓缩和干燥生物大分子不能用加热蒸发的方法。因此减压浓缩和冷冻干燥已成为生物大分子制备过程常用的浓缩干燥技术。低压冻干法是使蛋白质溶液在容器壁上冷冻，同时让液体在真空中升华，以得到冻干的样品。通过冷冻干燥所得的产品能够保持生物大分子物质的天然性质，还具有疏松，易于溶解的特性，便于保存和应用。这是保存生物大分子最常用和最好的方法。
常用词汇
生物大分子 Biomacromolecule 蛋白质 Protein
酶 Enzyme 核酸 Nucleic Acid
透析 Dialysis 结晶 Crystallization
超滤 Ultrafiltration 盐析 Salting out
亲和层析 Affinity Chromatography
