五．实验方法
1) ．菌种：
啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。
2）．培养基制备
培养基的加入量一般为罐容积的70％。将称量好的培养基组分，经溶解后加入到发酵罐中。此时培养液的体积为实际所需培养基容积的80％。
由于蒸汽杀菌过程中有大量的蒸汽转变为水，使发酵液体积增大。对于合成培养基的灭菌操作，葡萄糖与磷酸盐应分别灭菌后，在开始培养前加入以避免在杀菌过程中，葡萄糖与氮化合物之间发生美拉德(Malad)反应，以及磷盐与其他金属离子形成沉淀。溶液pH5．0.
除排气口加棉塞，并包牛皮纸或铝箔外，其他可用橡胶塞或截水夹封住。
3)．安装控制装置
连接好各种传感器的管线及通风、水管等,安装调试好pH 电极、温度计、氧电极、消泡电极等。
4)．杀菌
夹套内通入加热蒸汽，使培养液温度达到80℃以上。随后将蒸汽直接通人发酵罐，在121℃下杀菌15min。杀菌过程中，间断打开各阀门，排出内部空气，以保证各出管内杀菌完全。杀菌完成后，夹套内通入冷却水，进行培养基的冷却。为保证罐内正压，应通入适量无菌空气。
5)．接菌、培养
检查温度、通风和pH 等条件正常后接菌，将浸有酒精的脱脂棉围绕在接种口周围，点火后打开接种口，加入无菌水，调节好罐内培养液量,进而将种子培养液注入。接种量一般为1%～10％，盖好接种口后，调节搅拌转速至所需数值，培养开始。为了解培养过程中的变化，需定时取样进行样品分析。取样后应通入加热蒸汽，以防取样管路污染杂菌。
6)．制定因素水平表和选定正交表进行正交试验
7）．培养结束
将电极与培养液全部取出，培养液在121℃下杀菌15min 后，排放到指定地点。罐内应冲洗干净。
8) 菌体量(X)分析方法
用去离子水适当稀释培养液，在660nm 下测浊度。测干燥重量时，用事先干燥至恒重的定量滤纸(孔径1．2pm)过滤培养液，用去离子水洗两次，然后将其干燥至恒重(105℃，10h)，用电子天平称重。
9) 数据处理
画出培养液中葡萄糖(g／L)、酵母菌体量(g／L)随培养时间的变化曲线。计算酵母产率(质量分数，葡萄糖)。
