PEG 转化的基本步骤包括：①外源目的基因的制备；②原生质体制备；③目的基因和原生质体的转化培养；④转化体的鉴定及再生植物培养。PEG 转化法操作简单、成本低、无需昂贵的基因转化仪器；所得到的转化体中，嵌合体很少；受体植物不受种类的限制，对已建立了原生质体再生体系的植物都可采用；并且结果比较稳定，重复性好。但由于建立作物原生质体再生系统较为困难，加之PEG 转化法对原生质体活力的有害作用，使转化率低，一般在10-5～10-3之间。将PEG 转化法与电击法、脂质体法和激光微束法等技术结合使用，可使转化率大大提高。
3 脂质体法
脂质体(liposome)法是根据生物膜的结构和功能特征，用磷脂等脂类化学物质合成的双层膜囊将DNA 或RNA 包裹成球状，导入原生质体或细胞，以实现遗传转化的目的。脂质体法有两种具体方法：其一是脂质体融合法(liposome fusion)，先将脂质体与原生质体共培养，使脂质体与原生质体膜融合，而后通过原生质体的吞噬作用把脂质体内的外源DNA或RNA分子高效地转入到植物的原生质体内。最后通过原生质体培养技术，再生出新的植株。其二是脂质体注射法(liposome injection)，通过显微注射把含有外源遗传完整的脂质体注射
到植物细胞以获得转化。
脂质体法有多方面的优点，例如脂质体可以保护DNA在导入细胞之前免受核酸酶的降解作用，降低对细胞的毒害效应，包裹在脂质体内的DNA可以稳定贮藏，适应的植物种类广泛，重复性好等。最近美国BRL 公司研制了一种新型脂质体，只要将该脂质体与DNA简单地混合，即可将DNA包裹在脂质体内，并可有效地转化植物细胞。脂质体的商业化生产无疑为脂质体介导植物遗传转化法的广泛应用奠定了基础。
4 电击法
电击法(eletroporation)也称电穿孔法，其原理是利用高压电脉冲作用在原生质体上“电激穿孔”，形成可逆的瞬间通道，从而促进外源目的基因的摄入。随着技术的改进，并与化学法结合，目前该法的转化率可高达1.2%。
电击法的一般操作程序如下：将高浓度的质粒DNA加入到植物细胞的原生质体悬浮液中，混合物在 200 - 600 V / cm 的电场中处理若干秒钟，然后将原生质体在组织培养基中培养1～2 周之后，选择已转化的细胞，作进一步的分化培养，最后获得转化的再生植物。
电击法的优点是操作简便，特别适合于瞬间表达研究。缺点是必须经过原生质体培养，加上电穿孔易造成原生质体损伤，使其再生率降低。将电击法与PEG 转化法、脂质体法和激光微束法等技术结合使用及不断改进技术，都可有效提高转化率。
5 超声波法
超声波是指频率高于20kHz，人耳一般听不见的声波。它在介质中主要产生2 种形式的机械振荡，即横向振荡(横波)和纵向振荡(纵波)，前者只能于固体中产生，而后者则可在固、液、气体中产生。由于超声波频率高，波长短，因而在传播过程中具有定向性好，能量大，穿透力强等特征。
一般认为超声波的生物学效应主要是机械作用、热化作用和空化作用。超声波的机械效应是指超声波在介质中传播时，引起介质的振动，其位移、速度、加速度、压强等力学量所引起的效应。超声波的热化效应是指由于介质吸收超声波以及内摩擦消耗，分子产生剧烈振动，超声波的机械能转化为介质的内能，引起介质温度升高。超声波的强度愈大，产生的热效应愈强。超声波空化作用是指存在于液体中的微气核(空化泡)在声波的作用下振动，当声压达到一定值时发生的生长和崩溃的动力学过程。空化作用一般包括3 个阶段:空化泡的形成、长大和剧烈的崩溃。空化泡崩溃的极短时间内在空化泡周围产生高温高压，并伴有强烈的冲击波和速度极快的微射流产生。
超声波法转化(ultrasonic transformation)法就是利用低声强脉冲超声波的生物学效应击穿细胞膜造成通道，从而使外源DNA进入细胞。此转化途径可以避免脉冲高压对细胞的损伤作用，有利于原生质体的存活。此外，该法具有操作简便、设备便宜、不受宿主范围限制等优点。但该转化方法尚待进行更深入的研究使之完善。
6 激光微束法(laser microbeam)
将激光聚焦成微米级的微束照射细胞后，利用其热损伤效应使细胞壁上产生可恢复的小孔，使加入到细胞培养基里的外源基因进入植物细胞，从而实现基因的转移。该法具有操作简便、适用性广、无作宿主范围制、能转化细胞器等优点。但该方法因仪器昂贵，转化率较低，故有待于进一步研究和完善。
