3. 试剂
(1) MS培养基：见植物组织培养实验。
(2) LB培养基
Typtone 10g/L
Yeast Extract 5g/L
NaCl 10g/L
用5M调PH=7.0-7.2，定容，高压灭菌15-20min。固体培养基加入1.5％的琼脂。
(3) 分化培养基：MS + 0.05mg/L NAA + 1.0mg/L 6-BA。
(4) 生根培养基：MS + 0.1mg/L NAA或IBA
(5) 植物DNA提取液：Tris-HCl(pH8.0)100 mM/L，EDTA(pH8.0) 5 mM/L，NaCl 500mM/L,
SDS 1.25 %。
(6) TE 缓冲液：10Mm/L Tris-HCl(pH7.4)，5 mM/L EDTA。
(7) 质粒提取液：
(8) 异硫氰酸胍裂解液：4M/L 异硫氰酸胍，25mM/L 柠檬酸钠(pH8.0)，0.5%SDS，0.1M/L巯基乙醇。
4. 实验步骤
(一) 无菌苗的获得
选取饱满的油菜种子，在超净工作台上用70%的乙醇溶液消毒1min，然后用0.1% HgCl2处理10min，用无菌水冲洗5~6 次。将消毒的油菜种子播种于固体MS 培养基上，25~28℃,12~16h光照,光强1500Lx 条件下进行组织培养，苗龄期10~12d，获得无菌苗，取下胚轴作为转化受体。
(二) 农杆菌的活化
在超净工作台上挑取携带SsNHX 1 基因的EHA105 菌株的单菌落，放入含有50mg/L的卡那霉素和100mg/L 的利福平的液体LB 培养基中，在28℃条件下振荡培养20~22h(200r/min)，使农杆菌生长至对数期，OD值达0.3(600nm)。
(三) 侵染转化和选择
将活化的EHA105 菌液在4℃条件下离心10min (4000r/min)，弃去上清液，收集菌体，用液体MS 培养基稀释菌体，将下胚轴放入菌液侵染1min，迅速用滤纸吸干菌液，将下胚轴平放在分化培养基上，在黑暗条件下共培养2d。筛选下胚轴，用无菌水冲洗，除去多余菌体，用含有500mg/l头孢霉素的液体MS培养基浸泡下胚轴30min，以抑制农杆菌的生长。再将下胚轴平放于含有500mg/l头孢霉素和30mg/l卡那霉素的分化培养基上，于25~28℃、光照16h/d条件下进行筛选培养。2~4周后出现芽的分化。
(四) 生根
待芽长至1cm高左右，切下芽转至含有50mg/l 卡那霉素的生根培养基中，2~3 周即可生根。
5. 转基因植物的鉴定
