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功能基因cDNA 5’末端的克隆
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-9-4

    一.原理

    ⑴ 5’-RACE法

    ① 以目的mRNA 为模板,使用5’末端P 标记的RT 引物进行反转录反应,合成1ststrand cDNA。

    ② 使用RNase H 分解 Hybrid DNA-RNA中的RNA链。

    ③ 使用T4 RNA Ligase 使单链cDNA进行环化或形成首尾连接物。

    ④ 进行PCR扩增。


    图 4-2 5’-RACE 法原理

    ⑵ 引物设计

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