鉴定DNS-氨基酸，可用夹心型的聚酰胺薄板，即板的两面都涂有聚酰胺薄膜，板的一面点上待检样品；另一面点上标准样品。展层后，利用板的透明性鉴定未知DNS-氨基酸。一般情况下，如无这种薄板，则利用所得到的图与标准的图谱进行比较，有时还要计算相对迁移率，然后才鉴定氨基酸的种类。

DNS法鉴定肽和蛋白质的N-末端氨基酸或它们的氨基酸组成是比较方便，也比较灵敏的。但由于聚酰胺薄膜的质量不能保证完全一样，或者展层溶剂系统产生一些细微变化，这时所得图谱与标准图谱也会有差异，这就需要进一步证实差异原因，重复实验。

酪氨酸DNS化时，一般产生3种DNS化产物，即α-DNS-Tyr的黄色荧光同一般的DNS氨基酸差不多，而O-DNS-Tyr和di-DNS-Tyr带有亮黄色荧光。这3种产物展层后分离得比较开（图19-9）。如果Tyr的DNS化产物和甘氨酸、苯丙氨基酸DNS化产物一起展层，是到如图19-10的结果。


三、器材及试剂：
1．器材：
紫外灯，恒温水浴，小型干燥器（或400ml平底烧杯），烧杯，电炉，真空泵，塑料膜，水解管，磨口小试管，毛细管，聚酰胺薄膜。
2．试剂：
①DNS—Cl丙酮溶液：2—5mg DNS—Cl溶在1ml丙酮中，棕色瓶封口，暗处保存，数月稳定。买的商品可能含有一些白色不溶物质（水解产物DNS—OH），这种物质在试剂的保存期间也会慢慢产生。如果水解程度很少，对实验不会有很大影响（不会有很大干扰）。
②0.2mol·L^-1 NaHCO₃缓冲液（pH9.5）：用Na₂CO₃和NaHCO₃配制（Na₂CO₃∶NaHCO₃= 3∶7）。
③5.7mol·L^-1 HCl：用优级纯HCl配制。
④展层液：第Ⅰ相展层溶剂系统（1）：甲酸（88%）∶水=1.5：100（V/V）
第Ⅱ相展层溶剂系统（2）：苯∶冰乙酸=9∶1（V/V）
四、操作步骤：
1．丹磺酰化技术
（1）DNS—氨基酸制备：用0.2mol·L^-1 NaHCO3缓冲液配成2m mol·L^-1 浓度的氨基酸溶液。取0.1ml加入具塞玻璃试管中，同时加入0.1ml DNS—Cl丙酮溶液（2.5mg·ml^-1），反应要求最终浓度为氨基酸1m mol·L-1，DNS—Cl 5m mol·L^-1 ，丙酮5%（pH8.5—9.8）。用1mol·L^-1 NaOH调pH9—10，塞紧摇匀。置37℃保温1h，反应完成后放暗处保存，备用。
（2）多肽和蛋白质N-末端DNS化氨基酸溶液的制备：用0.2mol·L-1 NaHCO₃溶液配制2m mol/L多肽或蛋白质溶液。取0.1ml此溶液加入水解管中，加入0.1ml DNS—Cl丙酮溶液（2.5mg·ml-1），用1mol·L-1 NaOH调pH9—10，混匀后用parlfin封口，置37℃保温1h。反应完成后，蒸干丙酮，加5.7mol·L-1 HCl，抽真空封口，110℃保温16—20h，水解完成后，开管将溶液转移到5ml小烧杯内，蒸干盐酸，加几滴水再蒸干，反复数次使盐酸完全除净。用丙酮溶解样品、点样展层，即可得到样品的N-末端DNS-氨基酸。

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