（3）经过3次展层，有时，α组氨酸和精氨酸，α和ε赖氨酸分离还不完全，可用溶剂系统（4）在第Ⅱ相再展层一次（图19-6）。
3．猪胰岛素N-末端氨基酸残基图谱和氨基酸组成
（1）猪胰岛素N—末端分析（图19-7）。猪胰岛素由2条肽链组成，因此，纯的猪胰岛素有2个N—末端氨基酸，即甘氨酸和苯丙氨酸。还有两种非N—末端的氨基酸，即酪氨酸和赖氨酸。在紫外灯下可见到DNS-Gly和DNS-Phe，同时还可见到O-DNS-Tyr，ε-DNS-Lys。
（2）猪胰岛素氨基酸组成图谱（19-8）。猪胰岛素氨基酸组成包括：Gly，Phe，Leu，Ile，Pro，Val，Ala，Cys，Glu，Asp，Thr，Ser，His，Arg。胰岛素氨基酸组成中，Asp和Asn，Glu和Gln是分辨不出来的，因为经过水解之后，氨基酸的酰胺化合物都转变成为相应的酸，Trp（Try）也完全被破坏，测不出来。
测N-末端时，如果丹磺酰化完全得到负结果，则很可能此样品的N-末端是Trp，因为Trp的DNS-衍生物盐酸水解时全部被分解。丹磺酰化后的肽或蛋白质用链霉蛋白酶水解，则能很容易地检测出Trp。
