一、目的；
学习并掌握二苯胺法定量测定DNA含量的原理与方法。
二、原理：
脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大吸收。DNA在40—400微克范围内，光密度与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。除DNA外，脱氧木糖，阿拉伯糖也有同样反应。其它多数糖类，包括核糖在内，一般无此反应。
DNA分子中的脱氧核糖基，在酸性溶液中变成ω-羟基-γ-酮基戊醛，与二苯胺试剂作用生成蓝色化合物（λmax=595nm）。可用比色法测定。
三、器材与试剂：
1．器材：
①分析天平。
②恒温水浴锅。
③试管。
④吸量管（2毫升和5毫升）。
⑤分光光度计。
2．试剂：
①DNA标准溶液（须经定磷确定其纯度）：取小牛胸腺DNA钠盐以5m mol·L-1氢氧化钠溶液配成200微克/毫升的溶液。
②样品待测液：准确称取DNA干燥制品以5m mol·L-1氢氧化钠溶液配成50~200微克/毫升的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时，要求RNA制品的每毫升待测液中至少含有20微克DNA，才能进行测定。
③二苯胺试剂：
A液：称取1克重结晶二苯胺，溶于100毫升分析纯的冰乙酸中，再加入10毫升过氯酸（60%以上），混匀贮于棕色瓶中待用。
B液：配制1.6%的乙醛液，临用前配制。
临用时将A液20ml与B液0.1ml混合即得二苯胺试剂。
四、操作步骤：
1．标准曲线绘制：取干燥试管7支，按下表0—6号管操作。
2．样液测定：取2支试管按下表中7、8两号管操作。
五、结果与讨论：
1．DNA标准曲线绘制：
根据测定数据，以DNA含量（μg）为横坐标，OD595值为纵坐标，绘制出标准曲线。
2．DNA含量的计算：
