一． 实验目的：
1. 学习固体培养基的配制；
2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导方法。
二． 实验原理：
植物组织培养理论依据是植物细胞具有全能性。
植物组织培养是指用无菌培养的方法，在人工制备的培养基上培养植物体的一个离体器官、离体的一种组织，或单个细胞，这些离体的器官组织，或单个细胞在无菌条件下不断生长，并经过转移，能够一代一代的延续生长下去，它的方法与微生动物培养技术相似，全部在人工控制下进行。
组织培养技术内容是20年来已经从组织培养（组织块培养）发展到细胞培养、原生质体培养和细胞融合培养等等。并用之进行各种生理化及遗传操作研究。
三、实验剂试剂和设备
1．试剂一MS培养基需要量mg/L
NH₄NO₃                                       1650mg
KNO₃                                            190mg
KH₂PO₄                                         170mg
MgSO₄.2H₂O                                370mg
CaCl₂.2H₂O                                    440mg
FeSO₄.7H₂O                                   2.79mg
MnSO₄.7H₂O                                  8.6mg
H₃BO₃                                             6.3mg
KI                                                     0.83mg
NaMoO₄.2H₂O                               0.25mg
CuSO₄.5H₂O                                   0.025mg
COCl₂.6H₂O                                   0.025mg
甘氨酸                                              0.2mg
VB₁                                                   0.4mg
VB₆                                                   0.5mg

为了配制培养基方便，通常配制一系列的母液。大量元素可单独或混合配制成使用浓度的10倍，微量元素可混合配制成使用浓度的1000倍，维生素生长调节物质单独配制成使用浓度的1000倍，铁液也单独配成母液，常用的是EDTA螯和铁。
2．MS培养基母液的配制
（1）大量元素母液（10倍）配1000ml
NH₄NO₃               16.5g
KNO₃                    19g
KH₂PO₄                1.7g
MgSO₄.2H₂O        3.7g
CaCl₂.2H₂O           4.4
CaCl₂.2H₂O吸湿性强，称取随时盖盖子。以上分别溶解，顺序混合，因Ca易产生沉淀所以最后加入，可加热助溶，定容至1000ml。
（2）微元素母液（1000倍）
KI                         415mg
NaMoO₄.2H₂O     125mg
CuSo₄.5H₂O         12.5mg
CoCl₂.6H₂O            12.5mg
MnSO₄.7H₂O         11.15mg
ZnSO₄.7H₂O           4.3g
H₃BO₃                   3.1g
最后定容至500ml

[1] [2] [3] 下一页