DNA电泳上样量的控制
在分析性电泳中,一般样品投入量达50~100ng/带即可观察到清晰结果,而对于珍贵DNA样品则上样量达电泳的最低分辨率5~10ng/带也可。而对于一定量的DNA,当电泳时采用较薄的梳子制胶,则电泳时DNA条带相对较窄,观察较清晰;而随着电泳时间的延长,由于DNA分子本身有一定的扩散,电泳条带也会变浅。
对于染色体DNA的酶切片段包含各种大小的条带,上样量即使超过10mg条带也不会托尾,而单一条带(>10 kb)当上样量超过200ng就有可能产生托尾现象。
DNA电泳的标准分子量
目前各厂商开发了各种类型的标准分子量,有广泛用于PCR产物鉴定的小分子Marker,也有常规用的大分子Marker,图2-1为TAKARA公司提供的DNA标准分子量电泳(示意)图

图2-1 常用的DNA标准分子量电泳图
2.2 试剂与器材
1. 试剂
(1)50×TAE电泳缓冲液
242.0g Tris碱
100ml 0.5mol/EDTA(pH=8.0)
57.1ml 冰醋酸


