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DNA的凝胶电泳
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-8-29

    DNA电泳上样量的控制

    在分析性电泳中,一般样品投入量达50~100ng/带即可观察到清晰结果,而对于珍贵DNA样品则上样量达电泳的最低分辨率5~10ng/带也可。而对于一定量的DNA,当电泳时采用较薄的梳子制胶,则电泳时DNA条带相对较窄,观察较清晰;而随着电泳时间的延长,由于DNA分子本身有一定的扩散,电泳条带也会变浅。

    对于染色体DNA的酶切片段包含各种大小的条带,上样量即使超过10mg条带也不会托尾,而单一条带(>10 kb)当上样量超过200ng就有可能产生托尾现象。

    DNA电泳的标准分子量

    目前各厂商开发了各种类型的标准分子量,有广泛用于PCR产物鉴定的小分子Marker,也有常规用的大分子Marker,图2-1为TAKARA公司提供的DNA标准分子量电泳(示意)图

                          

    图2-1 常用的DNA标准分子量电泳图

    2.2 试剂与器材
    1. 试剂           
    (1)50×TAE电泳缓冲液
    242.0g  Tris碱
    100ml 0.5mol/EDTA(pH=8.0)
    57.1ml  冰醋酸

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