2  工业培养基筛选
2.1 原料
    玉米淀粉、黄豆饼粉、酵母粉、蛋白胨、鱼粉、CaCO₃、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O（其中黄豆饼粉过100目筛，酵母粉、蛋白胨、鱼粉均过80目筛）。
2.2 采用均匀设计
参照前人经验，取优化所用培养基的各组分的浓度大致范围为：A（玉米淀粉）1.5-6%；B（黄豆饼粉）1-5%；C（蛋白胨）0-0.4%；D（酵母粉）0-2.5%；E（鱼粉）0-2.5%。
将A、B、C、D、E等分后加以调整，形成因素水平表（表3）。为了避免高档水平相遇，调整B、D的水平顺序，将原来的10水平重新定义为1水平，逆时针旋转得到新定的水平序号，根据新的水平，选用均匀设计表U₁₀（10⁸）及其使用表（表4）来安排试验

2.3 采用正交设计

参考均匀设计的结果，采用L₂₇ ( 3¹³ )正交表来安排试验。因子与水平的确定见表5。

表5  L₂₇ ( 3¹³ ) 正交试验因素水平表（%）

水平	玉米淀粉	黄豆饼粉	蛋白胨	酵母粉	鱼粉	KH2PO4	MgSO4·7H2O	CaCO3
1	1.5	4.5	0.2	0	2	0.2	0	0.1
2	2.5	1.5	0.4	1	0	0.8	0.02	0.5
3	3.5	3.0	0	2	1	0	0.08	0

2.4 摇瓶试验
按照试验设计方案，分别配制不同培养基，250ml三角瓶每瓶装量25ml，灭菌前pH7.5。将活化菌种接种到新鲜的LB培养基中过夜，再按1%接种量转接到不同的培养基中，30℃下180 r/min摇床振荡培养，定时取样涂片染色观察菌体长势及芽孢晶体形成情况，30%芽孢脱落后终止培养。
2.5 计数
将发酵液在无菌条件下10倍稀释至10^-7、10^-8、10^-9，并将此3个稀释度在无菌条件下，吸取1ml于无菌平板中，每稀释度重复3个平板。将灭菌后冷至不烫手的平板计数培养基倒入平板中（8-10ml），迅速旋转平板，混匀后使培养基铺满整个平板，凝固后倒置平板于30℃培养18小时后取出。统计菌落数，选择稀释梯度中重复性最强者为试验结果。

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