一、实验目的
  通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法
二、实验原理
  RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。细胞裂解后，除了RNA，还有DNA、蛋白质和细胞碎片，通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。
三、仪器、药品与试剂配方
(一)   仪器
1．  低温离心机
2．  分光光度计
3．  琼脂糖胶电泳系统，用前先用1% Na OH溶液浸泡过夜，之后再用DEPC水浸泡冲洗。
4．  高压灭菌锅
5．  研钵、剪刀、一次性手套等
(二)   药品
1. 焦碳酸二乙酯(DEPC)
2. 吗啉代丙烷磺酸(MOPS)
3. 异硫氰酸胍
4. 醋酸钠(NaAc)
5. 氯仿
6. 苯酚
7. 甲醛
8. 乙醇
9. 乙二胺四乙酸(EDTA)
10. 琼脂糖
11. 异丙醇
(三) 试剂配方
1．  0.1% DEPC水
0.1   ml DEPC 加入100 ml三蒸水中，振摇过夜，再湿热灭菌。
2.  2 mol/L NaAc、0.5 mol/L EDTA、4 mol/L异硫氰酸胍、4 mol/L LiCl等均用DEPC水                       配制。
3. 5ΧMOPS 电泳缓冲液(pH 7.0)
MOPS      0.1 mol/L
NaAc       40 mmol/L
EDTA      5 mmol/L
四、实验步骤
（一）   总RNA的提取（方案一）
1. 实验前10天左右播种水稻种子，在3-4叶期，剪取1.2 g幼叶。放入研钵，在液氮中研磨成粉末状，移入10 mL离心管。加入
4 mol/L异硫氰酸胍       4 mL
          苯酚                    3 mL
          2 mol/L NaAc (pH 4.8)     0.3 mL 
          氯仿                    0.6 mL
混匀，冰浴放置30 min。
  2. 4℃，8000 r/min，离心13 min。
  3. 弃沉淀，取上清至另一干净无菌离心管中。
  4. 加入2倍体积无水乙醇，-70℃，0.5 h。
  5. 4℃，8000 r/min，离心13 min。

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