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茶叶茶多酚类物质的测定
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-8-26
    茶多酚是茶叶中的重要品质组成,含量多少与品种、栽培条件、加工方法有关,必须掌握其测定方法。酒石酸铁比色法,方法简便、快速,重现性好,容易掌握,已列为国家标准方法。
    在一定的pH条件下,酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物,在波长540nm处比色,在适当的浓度范围内,茶多酚的量与呈色的深浅成正比,可用分光光度法定量。本实验学习用酒石酸比色法测定茶多酚类物质的方法。
    一、试材及用具
    1.试材 茶叶磨碎试样
    2.仪器 分光光度计、实验室常规玻璃仪器(三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等)
    3.试剂
    (1)酒石酸铁溶液:称取硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)1g与酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)5g,加水溶解稀释至1L。该溶液可稳定10 d。
    (2)pH7.5的磷酸缓冲液 先配制以下两种溶液:
    a.1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液 称取11.876g的Na2HPO4·2H2O,加水溶解,稀释至1L (若用无结晶水的需称取9.47g,若用含12个结晶水的需称取23.872g,其余操作相同)。
    b.1/15mol/L磷酸二氢钾溶液 称取经110℃烘箱烘2h后的KH2PO4 9.078g,加水定容至1L。
    取a液85mL和b液15mL混合后,即为pH7.5的缓冲液。
    二、方法步骤
    1.配制标准溶液
    称取茶多酚纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg茶多酚的标准溶液。
    2.绘制标准曲线
    分别称取标准溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL于一组25mL棕色容量瓶中,各加水至5mL,再加酒石酸铁溶液5mL,加缓冲液至刻度,混匀后用10mm比色皿,以试剂空白作参比,于波长540nm处测定吸光度,绘制出标准曲线。
    3.茶汤制备
    准确称取磨碎试样3g,加450mL沸水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min摇瓶一次,过滤。洗涤残渣,滤液合并于500mL容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀。
    4.测定
    准确吸取茶汤1mL,注入25mL容量瓶中,加水4mL,酒石酸铁溶液5mL,用缓冲液定容至刻度,混匀。用10mm比色皿,以试剂空白作参比,于波长540nm处测吸光度,从标准曲线查得溶液含茶多酚的量。

    E—测试液测得的吸光度
    3.913—当吸光度等于1.0时,每mL试液中茶多酚的量(mg)
    M—试样量(g)
    m—试样干物率%
    L1—总试液量(mL)
    L2—所取试液量(mL)
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