唐晔盛　李　英　朱静洁　胡　欣　林志新　韩　斌　洪国藩

摘要　一种利用菌落直接PCR 扩增DNA 并用于测序的实验方法. 通过对引物的设计和菌液浓度控制, 使PCR
反应后的内容物对测序干扰减到最小. 与传统的测序过程比较, 它省去了抽提模板DNA 一步, 节省了大量时间
和实验成本. 另外此方法可对BAC 亚克隆库构建时由连接转化过程中导致的假阳性起筛选和鉴定作用. 采用该
法成功测定了籼稻( Oryz a sativa indica) 广陆矮4 号的L3173 号BAC DNA 全长序列(约100 kb) , GenBank 登
录号: AL512542.
关键词　菌落PCR , 水稻基因组, 测序

　　PCR 技术^{[ 1 ,2 ]} 目前已成功应用于cDNA 扩增,基因组测序^{[ 3 ,4 ]} , 医疗诊断和突变检测^{[ 5 ]} 等领域,是当今分子生物学领域一项不可缺少的实验技术手段. 当前基因组大规模测序大体遵循以下步骤: 建库2抽DNA2PCR 扩增并荧光标记(cycling) 2测序仪自动测序2组装分析.

更多详细内容：菌落P.C.R在大规模基.因.组测序中的应用