生物秀首页 新闻前沿 产业资讯 实验技术 仪器教程 生物考研 资源下载 生物人 物秀商城 生物论坛 图片 专业 博客 易生物 视频动画
生命科学实验中心
导航: 生物秀 > 实验 > PCR 实验 > PCR基础知识 > 正文
  • 倾力提供最优!
PCR技术的原理与方法
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-8-18

    PCR定义
    PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。可用于基因分离克隆,序列分析,基因表达调控,基因多态性研究等许多方面。

    PCR技术的基本原理
    一.PCR反应成分:
    1.模板DNA;2.引物;3.四种脱氧核糖核苷酸;
    4.DNA聚合酶;5.反应缓冲液、Mg2+等。
    二.PCR反应基本步骤:
    1.变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
    2.退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
    3.延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)

    1.变性(denaturation):通过加热使模板DNA的双链之间的氢键断裂,双链分开而成单链的过程。 
    2.退火(annealling):当温度降低时,引物与模板DNA中互补区域结合成杂交分子。 
    3.延伸(extension):在DNA聚合酶、dNTPs、 Mg2+存在下,DNA聚合酶催化引物按5’→3’方向延伸,合成出与模板DNA链互补的DNA子链。 
         以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。  

     

    [1] [2] [3] [4] [5] [6] 下一页

关于〖PCR技术的原理与方法〗的最新评论
昵称:      评分: 1分 2分 3分 4分 5分
内容:
生物秀实验频道
设为首页 | 加入收藏 | 关于我们 | 战略伙伴 | 友情链接 | 法律声明 | 广告服务 | 联系我们 | 网站地图
Copyright © 2003-2008 生物秀 (中国·生物秀科技) 版权所有 信产部备案:鲁ICP备05001831号
客服信箱:info@bbioo.com  客服电话:15800302289  客服QQ:254857951
www.bbioo.com All Rights Reserved.