（II）操作步骤
1、应用硅化载片裱片，于60℃烘烤切2小时。
2、切片脱蜡至水。
3、0.5%-1%高猛酸钾水溶液处理切片5分钟。
4、自来水洗。
5、2%草酸水溶液处理切片2分钟。
6、自来水洗。
7、用酸性福尔马林5-10处理分钟。
8、蒸馏水洗换3次，每次2分钟。
9、用银液处理10分钟（于37℃）
10、用预热至45℃的还原液，摔去还原液，加入新的还原液，如此反复数次，至镜下结果满意为止。
11、50%乙醇苯胺油轻洗10秒钟。
12、蒸馏水洗3次。
13、用氯水金调色。
14、自来水洗。
15、5%硫代硫酸钠处理切片5分钟。
16、脱水、透明、封固。
结果：神经纤维棕色至黑色。
（五）改良的Eager’s 法染变性轴索
（I）试剂的配制
a、氨银液
1.5%硝酸银 40ml
95% 24ml
浓氨水 4ml
2.5%氢氧化钠 3.6ml
b、还原液
无水乙醇 9ml
蒸馏水 81ml
1%柠檬酸 2.7ml
10%福尔马林 2.7ml
（II）操作方法
1、组织用福尔马林盐固定
2、自来水洗，浸入蒸馏水中。
3、恒冷切片附贴于硅化的载玻片上或切片收集于水杯内。
4、切片或用玻璃钩将切片移入2.5%硝酸双氧铀（uranyl nitrate）处理5分钟。
5、蒸馏水轻洗后置入氨银液中，直到切片变棕黄色为止，约10-15分钟。
6、直接进入还原液至颜色没有其它变化为止。约2-5分钟。
7、蒸馏水洗。
8、5%硫代硫酸钠处理切片5分钟。
9、水洗，将切片裱于载片上。
10、脱水、透明、封固。
结果：变性神经纤维，棕色到黑色。
正常的神经纤维，灰黄色。
（六）改良的Loyez氏法染神经髓鞘
（I）试剂的配制
a、碳酸锂苏木素液
碳酸锂（Lithium carbonate） 1ml
饱和水溶液
10%成熟苏木素无水乙醇液 5ml
蒸馏水 44ml
b、铬酸氧化液
重铬酸钾 10g
浓浓酸 10ml
蒸馏水 90ml
c、Loyez氏分化液
四硼酸钠 1g
铁氰化钾 1.25g
蒸馏水 100ml
（II）操作方法
1、切片脱蜡至水
2、入以b液为原液酸成10%的氧化液氧化切片24小时。
3、水洗。
4、入4%的铁明矾水溶液中媒染24小时。
5、蒸馏水洗。
6、入碳酸锂苏木素染液中浸染12-24小时。
7、自来水洗。
8、4%铁明矾水溶液分化，至髓鞘显示清晰为止。
9、自来水洗。
10、Loyez氏分化液分化切片约2分钟。
11、水洗。
12、常规脱水、透明并封固。
结果：髓鞘及红细胞显示深蓝色，轴索呈淡白色至淡黄色，其它组织也呈现淡黄色或灰黄色。
（III）注意事项
1、在常规活检中，组织固定都是以福尔马林为主，没有特殊的固定液，如果作为科研标本，则可预先准备好特殊固定液固定组织，这样效果会更好。
2、原法采用Laanna氏铬化液即重铬酸钾9.5g，氯化锌4.5g，蒸馏水100ml，未氧化切片，改良法采用5%铬酸氧化液氧化切片，氧化力更强，效果更好。载片须用硅化载片，否则切片容易脱落。
