(三)改良的Marsland, Glees方法
(I)试剂的配制:
取无水乙醇 10ml,加入20%的硝酸银水溶液,搅拌均匀后逐滴加入浓氨水,先是形成沉淀,后再逐滴加入氨水,让早期形成的沉淀彻底溶解,然后再加入另外2-3滴氨水,即可使用。平时保存于4℃冰箱中。
(II)操作方法
1、切片捞于硅化载玻片上,于60℃烘烤2小时后备用。
2、切片脱蜡至水。
3、0.5%高猛酸钾处理切片5分钟。
4、水洗。
5、2%草酸处理切片2分钟。
6、自来水洗,蒸馏水洗。
7、20%硝酸银于37℃中作用60分钟。
8、直接入10%福尔马林溶液中处理,直至切片颜色转为黄色到棕色为止,约10-20秒。
9、直接入上述氨银液处理30秒。
10、直接入10%福尔马林处理1-2分钟。
11、自来水洗。
12、5%硫代硫酸钠固定切片5分钟。
13、脱水、透明、封固。
结果:
神经纤维:深棕色至黑色,背景淡棕色。
注意事项:
1、整个过程,应仔细操作,防止污染造成背景染色。
2、切片在9步骤后于镜下检查,如果浸染程度不够,颜色较浅,可以重复8、9步。
(四)改良的Palmgren氏法染神经纤维
(I)试剂的配制:
a、酸性福尔马林
40%甲醛 25ml
蒸馏水 75ml
1%硝酸 0.2ml
b、银溶液
销酸银 15g
硝酸钾(Potassium nitrate) 10g
蒸馏水 10ml
5%醋酸氨(amino acetic acid) 1ml
c、还原液
焦 酚(Pyrogallol) 10g
蒸馏水 450ml
无水乙醇 550ml
1%硝酸 2ml
用前须静置24小时
d、调色液
氯化金 1g
蒸馏水 200ml
无水乙醇 550ml
1%硝酸 2ml
e、加强剂
50%乙醇 100ml
苯胺油(anilineoil) 2滴
f、固定液
5%硫代硫酸钠


