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神经系统染色技术
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-8-9

    (三)改良的Marsland, Glees方法
    (I)试剂的配制:
    取无水乙醇   10ml,加入20%的硝酸银水溶液,搅拌均匀后逐滴加入浓氨水,先是形成沉淀,后再逐滴加入氨水,让早期形成的沉淀彻底溶解,然后再加入另外2-3滴氨水,即可使用。平时保存于4℃冰箱中。
    (II)操作方法
    1、切片捞于硅化载玻片上,于60℃烘烤2小时后备用。
    2、切片脱蜡至水。
    3、0.5%高猛酸钾处理切片5分钟。
    4、水洗。
    5、2%草酸处理切片2分钟。
    6、自来水洗,蒸馏水洗。
    7、20%硝酸银于37℃中作用60分钟。
    8、直接入10%福尔马林溶液中处理,直至切片颜色转为黄色到棕色为止,约10-20秒。
    9、直接入上述氨银液处理30秒。
    10、直接入10%福尔马林处理1-2分钟。
    11、自来水洗。
    12、5%硫代硫酸钠固定切片5分钟。
    13、脱水、透明、封固。
    结果:
    神经纤维:深棕色至黑色,背景淡棕色。
    注意事项:
    1、整个过程,应仔细操作,防止污染造成背景染色。
    2、切片在9步骤后于镜下检查,如果浸染程度不够,颜色较浅,可以重复8、9步。
    (四)改良的Palmgren氏法染神经纤维
    (I)试剂的配制:
    a、酸性福尔马林
        40%甲醛                  25ml
        蒸馏水                     75ml
        1%硝酸                   0.2ml
    b、银溶液
           销酸银                  15g
           硝酸钾(Potassium nitrate)       10g
           蒸馏水                 10ml
           5%醋酸氨(amino acetic acid)  1ml
    c、还原液
           焦  酚(Pyrogallol)         10g
           蒸馏水                 450ml
           无水乙醇              550ml
           1%硝酸                2ml
           用前须静置24小时
    d、调色液
           氯化金                 1g
           蒸馏水                 200ml
           无水乙醇              550ml
           1%硝酸                2ml
    e、加强剂
           50%乙醇                     100ml
           苯胺油(anilineoil)    2滴
    f、固定液
           5%硫代硫酸钠

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