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各种组织特殊染色法—细菌染色法
作者:未知 来源:生物秀 时间:2006-8-9

    细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物。它形体微小,结构简单,无典型的细胞核,只有核质,无核膜和模仁不进行有丝分裂,除核蛋白体外无其他细胞器,在生物学分类上属于原生生物界中的原核细胞型.
    (一)细菌的形态
    细菌的种类很多,形态各异,但归纳起来,基本上只有三种形状,即球形、杆形和螺形。
    (二)细菌的基本结构
    细菌由细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质核成。细胞壁的主要成分为肽聚糖;细胞膜的主要成分为磷脂,细胞浆中的主要成分是水、蛋白质、核酸和脂类物;核质的主要成分为DNA。在病理技术中,与病理技术相关的是细菌的细胞壁,细胞壁上结构的变化是将其显示出来的关键。
    (三)细菌的特殊结构
    细菌除了上述的基本结构以外,能够显示出各种细菌的特性和形状的是他的特殊结构,根据细菌的特殊结构,就可以辨认出不同种类的细菌素。它的特殊结构是鞭膜、鞭毛、菌毛、芽胞[9]。
    (四)Warthin-Starry法显示幽门弯曲菌
    (1)操作方法:
    ①切片脱蜡至水。
    ②醋酸盐缓冲液冲洗切片2次,1分钟/次。
    ③入1%硝酸银水溶液(预热达60℃)处理切片60分钟,在烤箱中进行。
    ④于显影液中(60℃烤箱)3分钟,镜下控制,如果没达到要求,还可继续延长时间,直到合适为止。
    ⑤ 取出切片,用60℃热水洗切片。
    ⑥缓冲液洗切片。
    ⑦脱水,透明,封固。
    结果:胃腺上皮或腺腔内表面,胃幽门弯曲菌显示棕黄至棕黑色,HP可散在出现,也可成团出现,其余组织及背景显示棕黄色。
    (2)甲苯胺蓝染色法
    ①切片脱腊至水。
    ②蒸馏水浸洗3次。
    ③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
    ④水洗,洗去多余染液。
    ⑤各级酒精脱水。
    ⑥二甲苯透明,中性树胶封固。
    结果:在胃粘膜腺上皮表面,腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌(HP),有的呈弯曲杆状或逗点状,HP可散在出现,也可成团聚集出现,这要根据不同病例而异。
    试剂的配制:称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃冰箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为最佳,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。
     试剂配制:
    醋酸缓冲液(PH3.6)
    醋酸钠      1.64g
    醋  酸       2.5ml
    蒸馏水  凑足200ml
    2.1%硝酸银液
    硝酸银          1g 
    醋酸盐缓冲液(PH3.6)凑足100ml

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