⑵1%高锰酸钾氧化5分钟。
⑶自来水洗。
⑷2%草酸处理1-2分钟。
⑸自来水洗,蒸馏水洗。
⑹于碳酸氨银液中,在56℃烤箱内浸染40-60分钟。至切片呈黄棕色。
⑺速洗蒸馏水。
⑻20%福尔马林还原5分钟。
⑼水洗。
⑽0.2%氯化金水溶液调色1-2分钟。
⑾自来水洗。
⑿5%硫酸钠固定切片1-2分钟。
⒀如果需要,可作对比染色。
⒁脱水,透明,封固。
结果:网状纤维显示黑色,其它着染对比染色,胶原纤维不着色。
(3)银染注意事项:
①所使用的玻璃仪器,须用清洁液处理。
②配制氨银溶液时,氨水加入的量不能过多或不足,过多感应下降,会使液体过碱,滴染时,切片容易脱落,过少则感应上升,浸染效果不佳,不好掌握。
③配制氨银液时,有可能用玻璃蒸馏水。
④使用的化学试剂应尽量用分析纯以上。
⑤切片氧化漂白应彻底,不能使残存的福尔马林留于片上,否则将导致过早还原而使浸染不均匀。
⑥如果有某种原因而导致切片脱落时,应使用涂胶的载片,以增加附贴性,
⑦如有可能,氨银溶液以新配为佳,但也可保存于4℃冰箱中达一个月左右,这种液体易挥发,用后即须盖紧,当沉淀物出现时,该溶液应抛弃,
⑧20%福尔马林还原5分钟。
⑨应秀氯化金调色时,可将胶原纤维着染的黄棕色去除掉。
⑩上述四种方法,根据各单位个人的需要或爱好选择,没有什么区别。
(4) 临床应用
①可用于区别癌和肉瘤的诊断,
例如:网织细胞肉瘤和转移于淋巴结内的未分化癌,这两者在HE的染色切片都较难区别,前者可产生网状纤维,后者不产生网状纤维。鼻咽部活柱,应将网染作为常规,给予使用,可增加诊断的准确性。
②可用于区别血管内皮瘤(肉瘤)和血管外皮瘤(肉瘤),它的瘤细胞在网状纤维膜内,而血管外皮瘤则在网状纤维膜外,血管内皮肉瘤的瘤细胞呈泡巢状,周围多被网状纤维包绕;而血管外皮肉瘤的瘤细胞可见较多的网状纤维。
③可用于神经系统方面肿瘤的区别,
如:交感神经母细胞,脑的髓母细胞瘤,这些肿瘤的形态有时象肉瘤,但银染时,神经系统的网染为阴性,不过脑的原发性肉瘤有较多的网状纤维。
④可用于观察癌组织的发生发展过程。
如:原位癌,可见有完整的基底膜,而浸润性癌则可见到被破坏的基底膜。
⑤可用于区别淋巴系统方面的肿瘤,
如:淋巴肉瘤和网织细胞肉瘤,前者瘤细胞间的网状纤维比正常稍减少,后者则比正常时增多。
⑥可用于急性骨髓纤维化的鉴别诊断,该病的网状纤维增多,纤维可以是致密和融合性的。胶原纤维染色通常呈阴性,尽管偶尔有的病例可能显示胶原纤维化。


