⑥流水冲洗5-10min，
⑦丽春红苦味酸饱和液染5min，
⑧1%醋酸水溶液洗，
⑨1%磷钼酸分化切片约5min，
⑩蒸馏水洗，
⑾1%淡绿或者甲苯胺蓝滴染30s，
⑿1%醋酸水溶液洗切片，
⒀95%酒精分化，无水酒精脱水，
⒂二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：胶原纤维呈现绿色或蓝色，细胞核呈现灰黑或灰蓝色，肌肉和胞质红细胞呈现红色。
注意事项：
①Masson氏染液配完后保存时间不宜过长，如有可能，每次染色以染配为佳，如何可使着色颜色的鲜艳性。
②切片在各级酒精中脱水，时间不宜过长，否则会将着染的颜色脱去。
③切片保存所着染的颜色显长为1—2年以后会随着时间的延长而逐渐褪去，应予注意。
④磷钼酸和磷钨酸在染色法中的作用各有不同，磷钼酸作用于胶原纤维，磷钨酸作用于纤维胶]质，肌胶质，神经胶质和上皮纤维等。上述两种试剂的使用，可以促进组织有选择的染色，它们可以减少背景和核的染色，使背景清晰。
⑤如有可能，在组织固定时，用Zenker氏固定液固定，如此对染色效果将更好。
临床应用：
1.与淀粉样物的区别：
胶原纤维发生病变如坏死或透明变性时，它与淀粉样物在HE染色时被染为粉红色，不好区别。应用V.G染色法，能将胶原纤维染为粉红色，而淀粉样物将被染为黄色。
2.应用与间胚叶来源肿瘤的区别：
如纤维瘤（肉瘤），平滑肌、横纹肌瘤（肉瘤），神经纤维瘤（肉瘤）、恶性纤维组织细胞瘤等，由于都含有大量的纤维，HE染色均为红色。应用Masson氏染色法，可将胶原纤维染色蓝色或绿色，肌源性组织被染为红色。
3.应用与其他慢性炎症的区别。
如慢性阑尾炎，疤痕愈合时，纤维愈复病灶可被染为鲜红色或蓝绿色，SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕，粘连，此时可显示蓝色或绿色。
④可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假小叶，用上述方法显示时，可显示出不同的组织结构。V.G法可将包绕假小叶的胶原纤维染成红色，胆汗呈绿色。
小结
胶原纤维在上述的两种方汉中着染不同的颜色，如V.G着染红色，Masson氏着染蓝色或绿色。这主要取瘊于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应，而染料分子量的大小是关键，分子量小的分子移动迅速，行动快，对组织的渗透性较强，能穿透较为致密的组织。分子量大的染料分子移动较迟缓，渗透力较弱，可作用于组织强求构较疏松的组织，染色时间可适当延长。
在相关的染料中，分子量从小到大依次排列是：苦味酸（黄色）：229.11；桔黄G（黄色）：452；丽春红（红色）：480.42；酸性品红（红色）：585.53；苯胺蓝（蓝色）：737.72；亮绿（绿色）：792.72；甲基蓝（蓝色）>99。[2]
染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程，在应用这些方法时，必须根据不同的病例，选择不同的方法，认真地操作，方能获得最佳的效果。
