④特别适合于基层单位。基层单位，无需多大的投资，就能开展免疫组化的工作，这对于提高诊断的准确率，极有好处。
⑤价格较浓缩型抗体贵。
⑥即用型抗体不可作为常备贮存抗体。即用型抗体，一般有效期为一年。如果用量大的单位，对于3ml一个包装的抗体，一年需要用几支，这对抗体来说，不会造成浪费。但如果为较小的单位，一年中标记的病例较少，购买抗体时也尽量选小包装的抗体，如1.5ml。如果碰上罕见的病例，有时一年也标记不了几例，这样就应采用浓缩的了。即用型的抗体，有效期为一年，但真正购买到的抗体使用期就不可能为一年，因为抗体从生产商到销售商的手里，需要一定的时间，如果运气好的话，你购买到的抗体，是刚交到销售商的手里，那么，使用的时间可能长些，但如果在销售商的手中滞留了一段时间，抗体的有效使用期就可能不会太长，五个月、六个月或者三个月。如果在有效的时间内不能使用完。稍为超过一些时间还可以，如果时间过长，就应当丢弃，因为会影响标记的质量。有人抱怨，刚买的抗体标记很好，后来就渐渐不好了。这是因为随着时间的延长，抗体的活性会逐渐失去生物活性，导致了标记质量的下降。
（2）抗体的适应症。
在众多的抗体中，按它们的实际使用范围，把它们分为两个类：
1. 适合于冰冻切片，涂片，细胞培养片。
2. 适合于石蜡切片，冰冻切片，涂片和细胞培养片。
（3）选择合适的单克隆或多克隆抗体。
抗体除了分为上述的两个类外，从其克隆的高度讲，也有单克隆和多克隆之分。
1.单克隆抗体，在目前临床常用的抗体当中，大部分都是单克隆抗体。这要归功于生物技术的不断提高。在早些时候，应用于临床的抗体，大多数为多克隆抗体。
2. 多克隆抗体，在临床应用的抗体中，还有少部分的抗体为多克隆抗体。
（4）抗体的加入。
这看似很简单的问题，如果处理不好也可导致不同的结果，如果应用自动免疫组织化学染色仪，将程序输入即可，如为手工操作，就必须注意以下的问题：
1. 当PBS冲洗完毕后，在加入抗体，如一抗，二抗或三抗。必须将存留于切片上的多余的PBS摔干，但不能让切片干涸，切片干涸，往往可产生非特异性染色，切片上PBS存留过多，将会稀释加入的抗体，影响加入抗体的浓度，同时也将影响最后的结果，如假阴性等。
2. 加入的抗体以一滴为佳。
当擦干组织块周边多余的PBS后，切片保持着一定的湿润度，此时加入另外的抗体为最佳时候，滴入抗体以一滴50ml为好，加入后，轻微地摇匀地覆盖于切片上，使最后的结果稳定均衡，不至于有的地方有反应，有的地方无反应。
3. 切片没擦好将会影响加入抗体的质量，切片没冲洗干净，没擦试好，当加入抗体后，它可缩于切片的一边，此时你为了使加入的抗体能够完全地覆盖整个切片，便会使劲地加入抗体，此时的结果是，抗体依然滑向一边，或者完全露出，这不光没达到目的，还浪费抗体，正确的做法就是彻底地用PBS冲洗，摔干切片擦干切片周边的PBS，再滴入一滴抗体轻轻摇匀即可。
（5）选择合适的孵育时间。
第一抗体的孵育时间，有较多的使用范围，应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟，120分钟，对于研究性质的抗体孵育时间，也可按照上述的时间，但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育，根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜，原因是：
1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来，或者被吸附，造成背景的染色。
2.目前销售的抗体，纯度较高，特异性较强，不需要长时间的孵育，也能够结合得很好 。
3.长时间的孵育，较容易引起切片的脱落，造成染色的失败。
4.长时间的孵育，不利于临床病理报告的发出。
X、连接抗体的选用必须正确，否则可造成假阴性的现象。
免疫组化染色方法较多，如ABC法，SP法和EV二步法等，如果使用的是SP法，或者ABC法，这时就必须要仔细地选择好连接抗体，第一抗体有单克和多克隆炎分，连接抗体则要根据选用的抗体来进行，例如：第一抗体选用的是单克隆鼠抗人**抗体，连接抗体也要选择相应的免抗鼠IgG，这样才能连接上（目前生产厂家已生产出混合型抗体，即既适合于单克隆抗体，也适合于多克隆抗体。使用者不用担心连接不上，随便使用都可，但如果没有订购混合型的试剂盒，就必须注意的型号，使之完全适合所选用的抗体。）孵育的时间可在10分钟，20分钟或者30分钟，一般在室温中进行，如果室温低于20℃以下，则可在37℃的孵育箱中进行。
XI、复合物的使用及孵育时间的确定。
各种方法有各自的复合物，如ABC法，复合物是卵白素和生物素结合的复合物，再带有HRP，SP法，（LsAB法）的复合物是链雪菌素蛋白复合物，再带有HRP，EV二步法的复合物则是二抗和三抗连接在一起的复合物，再带上HRP，除此之外，根据水解底物的不同，可产生不同的颜色，例如：带有HRP的酶，水解的底物一般为DAB产生黄棕色，带AP的酶，水解的底物一般为AEC产生红色。
XII、PBS的冲洗
免疫组化的染色过程，除了前面的处理和加入的抗体外，都在PBS的冲冲洗洗中度过，PBS冲洗的正确与否，也是导致最后结果的关键。
