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蛋白质沉淀反应—加热沉淀蛋白质
作者:未知 来源:沈阳药科大学 时间:2006-8-8
    【实验原理】

    大多数蛋白质在加热时,由于空间结构被破坏而丧失其稳定性,因此变性凝固。蛋白质的热变性作用与加热时间平行,并随温度的升高而加快。短时间加热可引起凝固。加热时,盐类的存在及溶液酸碱度对蛋白质的凝固有很大影响。处于等电点状态的蛋白质加热时凝固最完全、最迅速。在强酸强碱溶液中,蛋白质分子带有正电荷或负虽加热也不凝固。但溶液中若有中性盐存在,则蛋白质可因加热而凝固。

    【试剂】

    1.蛋白质溶液(与双缩脲反应相同)
    2.1%醋酸溶液
    3.10%醋酸溶液
    4.10%氢氧化钠溶液
    5. 饱和氯化钠溶液

    【实验操作】

    取试管4支依下表所示添加试剂。

    试剂

    管号

    1

    2

    3

    4

    蛋白质样液(ml)

    1.0

    1.0

    1.0

    1.0

    1% 醋酸,滴

    1

    10% 醋酸,滴

    10

    10% NaOH,滴

    10

    蒸馏水,滴

    10

    1

    1

    11

    现象

     

     

     

     

    加毕混匀,观察各管的情况。然后放入沸水浴中加热10分,注意观察比较各管的沉淀情况。其中2号管溶液接近于蛋白质等电点,最不稳定,最先沉淀;其次是第一管;3号和4号管因在较强的酸或碱下,蛋白质带有大量的电荷,虽然加热也不沉淀。向第三管中加入少许饱和氯化钠溶液,立即出现白色沉淀。
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