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蛋白质沉淀反应—蛋白质的盐析作用
作者:未知 来源:沈阳药科大学 时间:2006-8-8
    【实验原理】

    盐析现象是指—般蛋白质在高浓度盐溶液中溶解度下降,故向其溶液中加入中性盐至一定浓度时,蛋白质即自溶液中沉淀析出。盐析作用与两种因素有关:
    ①蛋白质分子被浓盐脱水;
    ②分子所带电荷被中和。

    蛋白质的盐析作用是可逆过程,用盐析方法沉淀蛋白质时,较少引起蛋白质变性,经透析或用水稀释时又可溶解。

    盐析不同的蛋白质所需中性盐浓度与蛋白质种类及pH有关。分子量大的蛋白质(如球蛋白)比分子量小的(如清蛋白)易于析出。球蛋白在半饱和硫酸铵溶液中即可析出,而清蛋白需在饱和硫酸铵溶液中才能析出。

    【试剂】

    1.鸡蛋清的氯化钠溶液(一份鸡蛋清加10份的0.9%氯化钠溶液)
    2.固体硫酸铵
    3.10%氢氧化钠溶液
    4..1%硫酸铜溶液

    【实验操作】

    1.取鸡蛋清氯化钠溶液约2ml于试管中,加入硫酸铵粉末,至硫酸铵饱和不再溶解为止,此时溶液颜色为乳白色,用滤纸过滤。

    2.取滤液做双缩脲反应,检查滤液中有无蛋白质存在。 
    蛋白质沉淀用1ml蒸馏水溶解后作双缩脲反应,证明盐析的蛋白质重新溶解于水而未引起变性。
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